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灰霉病是一种全球性真菌病害,主要由灰葡萄孢Botrytis cinerea引起。目前甲氧基丙烯酸酯类(QoIs)和琥珀酸脱氢酶抑制剂(SDHIs)两类现代呼吸抑制剂是生产上用于防治灰霉病菌的重要药剂。 本研究采用菌丝生长速率法,连续监测了2010-2012年间浙江省果蔬灰霉病菌对QoI类杀菌剂嘧菌酯的敏感性变化。结果表明:病菌群体中的低敏感性亚群体的比例明显上升,EC50值>5 mg/L菌株的比例分别为12.5％、15.8%和28.3%;旁路氧化在灰霉病菌菌丝生长阶段和孢子萌发阶段对嘧菌酯敏感性的平均相对贡献值(F)分别为2.91±0.89和5.72±2.82;嘧菌酯抗药性菌株的菌丝生长速率、产孢量、产菌核数和致病力与敏感菌株相比无显著差异。分子机制研究表明,灰霉病菌中存在两种类型的cyt b基因:I型cyt b基因在第143位密码子后紧跟内含子;II型cyt b基因在第143位密码子后没有紧跟内含子。大多数的灰霉病菌菌株属于 II型。I型菌株均为嘧菌酯敏感菌株, II型菌株为嘧菌酯敏感菌株或抗性菌株。抗药性机制为G143A。 分别采用菌丝生长速率法和区分剂量法连续监测了2012-2013年间浙江省和省外果蔬灰霉病菌对SDHIs类杀菌剂啶酰菌胺的敏感性变化,结果表明2013年灰霉病菌对啶酰菌胺的敏感性比2012年明显下降。2012年的敏感菌株占77.7%,低水平抗性菌株占13.3%,高抗菌株频率为10%;2013年的敏感菌株占64.9%,低水平抗性菌株占19.3%,高抗菌株占15.8%。啶酰菌胺抗药性菌株在 PDA平板上的菌丝生长速率、产孢量、产菌核数与敏感菌株相比较无显著差异。抗药性分子机制表明,抗药性分子机制为SdhB基因的S244T突变和H277T或H277R双重突变。 随机选取采自浙江省临安市、诸暨市、建德市、河北省、甘肃省、安徽省的草莓和葡萄灰霉病菌共36株,测定其ITS、SDHB、CYTB、TUB4段基因的序列,并建立其系统进化树。结果表明,除了SdhB基因的进化可能与抗药性相关外,其余菌株进化与地域、寄主和是否抗药无明显相关。