Arthrobacter globiformis酯酶基因的克隆、表达和酶活性测定

来源 :华东理工大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sharethesun
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
合成菊酯是一种安全、高效的杀虫剂。它具有杀虫效果好、对哺乳动物低毒等优点,但是它在使用的时候通常是作为一种混合物,右旋、反式乙基菊酸被证明是除虫菊酯的活性部分。在左旋、右旋—反式、顺式—菊酸立体异构混合物当中,用化学方法可以合成菊酸混合物或者它们的前体。但是,化学分离的方法需要相当冗长、复杂的步骤、过程,产品的得率很低。一种新型的酯酶具有立体选择性水解菊酯异构物,生成右旋—反式菊酸的作用。为了获得这种具有立体选择性的酯酶,本论文从Arthrobacterglobiformis中克隆酯酶的编码基因,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。通过重组大肠杆菌获得细胞的高密度培养物,获得酯酶。通过透析的方法对表达产物进行了复性,获得了有活性的粗产物蛋白。并且,用Ni2+金属螯合层析的方法对产物进行了纯化。同时,对表达的条件进行了优化。经过纯化的粗产物活性实验表明,酯酶表现出了较高的催化活性,为菊酯作为更高效、更安全的杀虫剂奠定了基础。
其他文献
近年来食品安全和食品在贮藏期间损失量较大等问题日益严重,由于食品超高压加工技术具有独特的优势因而成为倍受关注的非热加工技术之一。食品经过超高压加工后不仅能够延长保鲜时间,而且能在最大程度上保留食品的色泽风味以及营养成分。食品超高压加工技术协同温度处理在一定程度上可以提高灭菌效率和保障食品安全。因此食品超高压加工技术在未来是非常具有潜力的一项高新技术。本文研究对象为食品超高压设备的关键承压部件中的超
学位
电火花加工颗粒增强铝基复合材料(AMCs)是一种非常有前景的加工方法,可以避免传统刀具破损,降低加工成本,但是电火花加工AMCs也存在自身的缺陷,这些问题主要是由PRAMCs材料中
肿瘤细胞受体及其细胞信号传导异常在肿瘤发生、发展中起到重要作用,以受体及其细胞信息传导为靶点的肿瘤靶向治疗是近年肿瘤学研究热点。许多恶性肿瘤细胞可大量合成、释放内
在汽车侧面碰撞中,骨盆是人体易受损伤的部位之一。研究侧面碰撞中骨盆的损伤机理,可以了解骨盆损伤生物的因果关系,从而有效地设计汽车被动安全装置,提高乘员的安全性。本研
期刊
前不久,听说中国第一位记忆研究生杜有志在长沙市青少年宫举办记忆训练营,学习场面异常火爆。虽然开办多期,但因为人数太多,要求报名的学员还是源源不断。记者走进长沙市青少
期刊
甲醛是一种常见的化学物质,广泛存在于人类生产和生活的各个领域。研究表明,甲醛对人体健康产生多种危害,包括对皮肤粘膜、免疫系统、生殖系统、内分泌系统等的刺激、致敏和致毒
随着近代工业的快速发展,传统的测量系统已无法满足工业现场的测量环境复杂、测量对象多样、测量过程自动化等需求。因此,研发灵活适用于近距离小尺寸测量和中远距离大尺寸测量
流变学主要是研究物体在外力作用下产生的流变行为的一门科学,在涂料、油墨、橡胶和日化等许多工业领域中部具有极为重要的作用。而流变助剂对于调节流体的流变性,又起着至关