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棉铃虫是一种重要的农业害虫，危害多种农作物，给棉花生产带来巨大损失，而且对多种化学农药产生了严重的抗药性。棉铃虫单粒包埋型核多角体病毒(Helicoverpa armigera single NPV，HaSNPV)是专性侵染棉铃虫杆状病毒。随着分子生物学的发展，有许多基因的功能被了解清楚，例如HaSNPV ORF128基因，HaSNPV ORF135基因等，但是，还有许多基因的功能是未知的，例如：HaSNPV ORF115a基因和HaSNPV ORF127基因。在本研究中，作者对HaSNPV ORF115a和HaSNPV ORF127基因进行了生物学信息分析，克隆了这两个基因，并在大肠杆菌中进行了表达，为下一步功能的分析打下基础。本研究的主要结论如下： 1 HaSNPV ORF115a基因的初步研究结果 HaSNPV ORF115a位于HaSNPV C1菌株基因组中109，493bp和110，419bp之间，编码区有926bp，编码一个308氨基酸的多肽，分析表明：其分子量为37.135KDa，等电点为5.14。利用ExPASy server对HaSNPV 115a基因推测的蛋白序列进行分析，结果发现在所推测氨基酸序列中不存在信号肽序列、转膜区、核定位区和膜滞留区，但在838-851核苷酸处发现一些重要的基序，这些基序包括：1个Thiolases actire位点、1个Thiolases acyl-enzyme intermediate signature和1个Thiolases signature。通过对HaSNPV ORF115a的进化分析发现HaSNPV ORF115a与美洲棉铃虫核型多角体病毒同源关系最近。 根据已发表的GenBank中已登录的HaSNPV C1株基因组的核苷酸序列(GenBank登录号为AF303045)设计并合成引物，以HaSNPV C1株基因组为模板，利用PCR技术扩增到HaSNPV ORF115a基因，并将其连接至pMD18-T Easy载体上，并利用设计的酶切位点将目的基因从T载体上切下。在T4 DNA Ligase酶连接作用下，将ORF115a目的基因与DGEX-4T-2载体连接。连接产物经转化并用BamHⅠ和Xho Ⅰ双酶切鉴定，得到表达载体质粒pGEX-4T-2-ORF115a；经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳，与对照相比在63KDa左右出现一条特异性高浓度条带，pGEX／Ha115经IPTG诱导后产生的与预期分子量的大小相符。经Western blotting分析进一步证实，63KDa的特异性条带与抗GST抗体发生很强的印迹反应。这说明DGEX／Ha115a经IPTG诱导后产生的63KDa的特异性条带是Ha115a与GST融合的蛋白。 2 HaSNPV ORF127基因的初步研究结果 通过对HaSNPV ORF127基因核苷酸序列进行了生物学信息分析，HaSNPV ORF127位于HaSNPV C1菌株基因组的119，723bp和120，301bp之间，编码框有578个核苷酸，编码192个氨基酸残基，利用http://www.expasy.ch/tools/网站对HaSNPV ORF127基因编码的氨基酸序列进行分析发现，其分子量为22.567 KDa，等电点为9.82。通过对HaSNPV ORF127的进化分析发现HaSNPV ORF127与HzSNPV ORF131同源关系最近。