叶酸是人体必需的维生素，对核酸合成和氨基酸代谢等生理活动具有重要作用，监测合成叶酸纯品的含量并对其中杂质进行分析对相关药物的质量控制上具有实际意义，但目前对于其有机杂质的种类及含量尚无文献报道。本文采用质量平衡法对叶酸杂质进行了系统性的分析，利用三重四极杆液相色谱-质谱联用法对叶酸有机杂质进行鉴定，得到杂质蝶酸、对氨基苯甲酰谷氨酸的含量分别为0.07％、0.31％，卡尔费休水分滴定法测得水分含量为7.60％，离子色谱法测得氯离子含量为0.03％，质量平衡法计算叶酸纯度值为91.1％±0.6％。本课题中对杂质的定性定量分析为叶酸一级标准物质的研制奠定了基础。　　人胰岛素是一种结构较为简单的蛋白质，是体内唯一具有降血糖功能的激素，在常用的分析检测方法中，免疫法缺乏对失活胰岛素的识别，而同位素稀释质谱法的前处理过程较为复杂。本课题研究了定量核磁共振法在人胰岛素纯度分析中的应用。首先利用液相色谱法分离纯化，得到了几乎不含有机杂质的高纯样品(液相色谱检测纯度为99.78％)。实验优化了流动相梯度、添加盐种类及用量、流动相pH、溶剂浓度等纯化条件，冻干过程中加入冰袋以降低温度的方法也大大减弱了样品在该过程中的降解程度。然后利用定量核磁法对纯化后产品进行定量分析，纯化后人胰岛素及氘代盐酸的应用使得核磁共振谱图上蛋白质与内标马来酸的定量峰独立无干扰，最终得到了人胰岛素标准品的准确量值。最后以纯化后人胰岛素作为标准品利用液相色谱法对市售样品进行纯度测定。市售人胰岛素样品的纯度值为84.52％±1.14％，比传统的同位素稀释质谱法结果86.6％±3.4％更精确。实验成功将定量核磁共振法的应用拓展到了分子质量为5800g/mol的大分子物质纯度检测分析中，为蛋白质类大分子的纯度检测提供了一种新的参考方法。