本文对从重庆市涪陵区江东磨盘沟桫椤林保护区采集的桫椤和齿叶黑桫椤的POD同工酶以及POD的分离纯化及动力学性质进行研究,为进一步保护珍稀濒危的桫椤种类,有效地利用常见的桫椤资源提供科学依据.过氧化物酶[peroxidase,POD,EC1.11.1.7(x)]是广泛存在于各种动物、植物和微生物体内的、其结构和作用机理并不完全相同的一类含血红素的氧化酶,一般含有铁或铜等金属离子.其功能主要有保护细饱免受有毒的过氧化物损害:负责H<,2>O<,2>的清除:细胞应激高氧化环境压力提供保护;在木质素的生物降解中起重要作用;参与细胞壁和生长素合成;组织愈伤;与超氧化物歧化酶(SOD)相互协调配合,清除过剩的白由基,使植物体内的自由基维持在一个动态的正常水平,以提高植物的抗逆性等等.现将研究结果报告如下:1.桫椤过氧化物酶同工酶比较研究(1)桫椤与齿叶黑桫椤的过氧化物酶同工酶的酶谱比较电泳图谱表明,桫椤与齿叶黑桫椤的过氧化物酶同工酶带有明显差异;在POD酶活性上也有较大差异(桫椤POD活性为15.6活性单位,齿叶黑桫椤POD活性为64.8活性单位).(2)涪陵城区江东磨盘沟不同居群桫椤POD同工酶比较研究不同居群桫椤样品的POD同工酶酶谱差异不大,不论是酶带数目、带型、还是迁移率都表现出相似的特点,这说明这些桫椤虽然是从不同的地点采集的,但相距并不远,并没有出现明显的种群分化,只是属于不同的生态型.2.齿叶黑桫椤POD的分离纯化与性质研究(1)分离纯化齿叶黑桫椤叶片提取液经过硫酸铵盐析、透析、DEAE-琼脂糖凝胶柱层析和SephacrylS-200凝胶柱层析分离得到纯化的POD,其纯化倍数为26.29,同收率为27.04%.(2)基本性质研究通过SDS-PAGE法测得POD的分子量为43,000 D.通过IEF-PAGE法测得POD的等电点为4.55.齿叶黑桫椤POD最适pH在4左右.最适温度在45℃左右.Km值在最适温度45℃,最适pH 4的条件下为0.07mol/L.