N-甲基咪唑功能化磁粒的制备及其在生物样品分离中的应用

来源 :华南师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:THE_BOSS
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
对细菌进行有效的检测和定量是预防和治疗传染病必不可少的先决条件,本文提供了一种的检测和定量大肠杆菌的方法。N-甲基咪唑磁性微粒作为一种有效的磁性材料被用于对大肠杆菌进行分离和浓缩。对影响细菌的吸附和洗脱的各种因素,包括吸附缓冲液pH值,洗脱缓冲液的浓度以及洗脱时间等都进行了优化。通过毛细管电泳的分析确定了细菌浓度和PCR产物峰面积之间的线性关系。使用该磁粒可以快速富集500毫升水样中的微量大肠杆菌,且吸附效率可以达到99%。用该方法可实现大体积自来水和矿泉水样品中加标细菌的定量,在自来水和矿泉水样品中的回收率可达到83%至93%。研究结果表明,MIm-MPs-PCR-CE方法可应用于检测和定量实际样品中的细菌。  制备出的N-甲基咪唑磁粒也应用到转基因大豆基因组DNA的固相提取中。MIm-MPS吸附DNA主要是由于带正电荷的磁粒与带负电荷的DNA之间的强静电相互作用。与DNA相比,高浓度磷酸根离子与磁粒的静电作用更强,因此利用高浓度磷酸盐溶液将DNA从磁粒-DNA结合物上进行洗脱。提取过程不涉及苯酚,氯仿和异丙醇等有害的试剂使用,且可实现高产率(每30毫克的样品提取出10.4微克DNA)和高纯度(A260/280=1.82) DNA的提取。提取的DNA通过双重PCR反应和产物的CE分析,确认了其完整性。实验结果表明,该方法可实现快速高效提取DNA模板,且能实现双重PCR产物的便捷检测。
其他文献
学位
我国教育改革及教育发展规划的重心就是培养鼓励学生通过实验实践来解决问题以及用于探索发现新事物的创新的精神,这也是我国长期教育改革的主题和目标。教育部十二五的规划中
学位
染色体不稳定性是大多数肿瘤细胞特别是实体瘤细胞和体外转化细胞的基本特征。其表现形式包括整条染色体的获得或缺失,杂合缺失,染色体易位重排,基因扩增等。目前认为染色体不稳
学位
随着高功率微波技术的不断发展,高功率微波天线作为高功率微波系统终端体现的作用日益受到人们的重视。在诸多的高功率微波辐射技术中,采用高功率微波馈源照射反射面天线进行
学位
立方相的Y2O3晶体具有稳定性好、光学透明区域宽、热导率高等优点,是一种非常有前景的固体光学材料。然而,其熔点高达2430℃,且在2350℃附近存在相变,因此用常规的方法很难生长出
学位
没有雾霾,没有烦忧,推门即揽湖光山色……若问都市人最愿意到哪儿去,秀山丽水无疑是一个绝佳选择。如今,随着乡村旅游的不断升温,越来越多的游客喜欢栖居在乡间民宿,在绿水青