壬基酚聚氧乙烯醚(NPnEO)是一种重要的非离子表面活性剂，广泛应用于人类的生产和生活中。自然环境中的壬基酚聚氧乙烯醚主要来源于城市污水，经生物降解后逐步转化为壬基酚(NP)、壬基酚一乙氧基醚(NP1EO)和壬基酚二乙氧基醚(NP2EO)。目前，壬基酚聚氧乙烯醚的无害化处理已经成为环境领域的热点，关于壬基酚聚氧乙烯醚的微生物降解已开展了很多研究。在研究过程中需要对降解产物进行定量测定，为降解工艺分析提供参数支持，因此建立微生物降解水样中壬基酚及聚氧乙烯醚的分析方法是非常重要的。　　 本研究建立了同时测定微生物降解水样中NP及11种NPnEO的高效液相色谱法。考察了流动相组成及配比、流速、柱温、检测波长和进样量对测定的影响，确定了最佳色谱条件：Hypersil APS-2氨基色谱柱，流动相为异丙醇-正己烷-二氯甲烷体系，采用梯度洗脱方式，紫外检测波长277nm，柱温30℃，流速1.0mL/min，进样量10.0μL。在最佳实验条件下，各组分标准曲线的线性相关系数为0.9720～0.9999，检出限为0.1～0.5μg/mL。样品的平均回收率55.9％～154.5％，相对标准偏差1.1％～11.8％，实现了50min内对微生物降解水样中NP和NP1～11EO的同时测定。　　 本研究建立了测定微生物降解水样中NPnEO(n平均值为10)总量的二阶导数紫外光谱法，确定了最佳实验条件。以水作为溶剂，以283nm和288nm处的导数峰作为特征峰，以两峰最高点之间的垂直距离作为定量依据。在最佳实验条件下，NPnEO的标准曲线在1.8～440μg/mL范围内呈现良好的线性，线性相关系数为0.9995，检出限为0.5μg/mL。对实际降解水样进行了测定，NPnEO的回收率在98.1％～104.4％之间，相对标准偏差为1.9％～2.1％。　　 研究结果表明，高效液相色谱法的灵敏度和分析效能高，可用于微生物降解水样中NP及11种NPnEO的同时分离和测定。二阶导数紫外光谱法操作简单，分析速度快，适于测定微生物降解水样中NPnEO的总量。