论文部分内容阅读
我国鸡骨资源丰富,开展鸡骨中多糖的提取研究,对提升鸡骨附加值具有重要意义。近年来硫酸软骨素的心血管疾病及关节炎治疗作用越来越受到人们的认可,为开发硫酸软骨素的提取资源、实现副产物的高值化利用及提高鸡骨深加工程度,本论文以鸡腿骨为原料,对其基本营养成分及酸性多糖的分布进行分析,采用碱提酶解法和热提树脂吸附法提取鸡骨硫酸软骨素并对其进行结构鉴定,为鸡副产物的利用提供了一定的理论依据和技术支持。具体结果如下:1.通过测定鸡腿骨中的基本营养成分及阿利新兰染色可知酸性多糖主要存在于鸡腿骨两端含有软骨组织部位,为鸡腿骨中硫酸软骨素的提取提供依据。采用碱提酶解方法将鸡腿骨分为两端与中间部位分批提取硫酸软骨素,鸡腿骨两端部位硫酸软骨素的得率为4.25%,鸡腿骨中间部位的硫酸软骨素得率为1.32%,经超滤纯化后,纯度分别可达90.71%和88.59%。表明鸡腿骨能够作为原料用来提取硫酸软骨素。2.通过单因素及响应面试验筛选出一种适合于工业生产的热提树脂吸附法提取硫酸软骨素,其最佳工艺条件为树脂用量10%、吸附时间4.3h、洗脱液浓度2M、洗脱时间1.3h,在此工艺条件下,硫酸软骨素得率为0.14%。各因素对硫酸软骨素得率的影响顺序为:树脂用量>吸附时间>洗脱液浓度>洗脱时间。热提树脂吸附法提取硫酸软骨素的最佳该方法实现了鸡骨副产物价值最大化利用,与传统的碱提及酶提法相比有利于环境的可持续发展,适合于工厂生产。3.对纯化后的鸡腿骨两端提硫酸软骨素样品（CS1）、鸡腿骨中间部位提硫酸软骨素样品（CS2）和热提树脂吸附法提硫酸软骨素样品（CS3）分别进行含量分析、紫外光谱分析、红外光谱分析、琼脂糖凝胶电泳分析、单糖组成分析以及二糖组成分析。结果显示鸡骨CS1、CS2和CS3的紫外光谱均在210-220nm处出现最大吸收峰;所得硫酸软骨素样品与硫酸软骨素A标准品的红外光谱图基本一致,且均在850cm-1处有吸收;硫酸软骨素样品与硫酸软骨素A标准品在琼脂糖凝胶电泳中有相同的迁移率;鼠李糖和葡萄糖醛酸是硫酸软骨素样品中的主要单糖;单硫酸基二糖ΔDi6s和ΔDi4s为所提取的硫酸软骨素样品的主要构成单位。综上分析,表明本试验所提取的硫酸软骨素主要为A型硫酸软骨素,且结合了少数的氨基酸,共价结合形成硫酸软骨素肽。