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目的探讨出生1～3天SD大鼠脊髓神经干细胞的分离、培养及鉴定方法。建立了一种简便易行的NSCs获取方法,为进一步脊髓神经损伤修复的动物实验提供依据。方法取出生1～3天SD大鼠乳鼠脊髓,吸管吹打机械分离制成单细胞悬液,采用无血清培养和胎牛血清诱导分化,后于相差显微镜下进行形态学观察及免疫细胞化学进行鉴定。结果原代及传代培养均观察到形成细胞克隆,克隆中的细胞巢蛋白(nestin)表达阳性,显微镜下观察见典型的干细胞特征,诱导后可分化GFAP表达阳性的胶质细胞。结论分离和培养的细胞能表达神经干细胞的特异性标志物巢蛋白,并且具有很强的增殖能力和多向分化潜能,说明大鼠乳鼠脊髓中存在神经干细胞,并可用于进一步的实验研究。