目的:观察强直性脊柱炎（AS）患者外周血中调节性T细胞（Treg）、调节性B细胞（Breg）、IL-10和IL-35水平变化,探讨IL-35对AS患者Treg、Breg细胞水平及功能变化的影响。方法:1.选取AS患者42例,根据Bath AS疾病活动指数（BASDAI）评分将AS患者分为AS低活动组（n=26）和AS高活动组（n=16）;另选取同期健康体检者30例作为正常对照组。流式细胞术（FCM）检测外周血中CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg细胞、CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg细胞和CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞的百分比;流式细胞微球捕获技术（CBA）检测血清中IL-10的水平;酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清中IL-35的水平;实时荧光定量PCR法（RT-PCR）检测外周血单个核细胞（PBMCs）中EB病毒诱导基因3（EBI3）、p35的m RNA表达水平。比较各指标在组别间的表达差异,并分析各指标之间的联系。2.另选取AS患者35例,提取PBMCs,利用重组白细胞介素-35（r IL-35）体外干预PBMCs,并收集上清液和细胞。ELISA法检测上清液中IL-10的水平;FCM检测CD4⁺T、CD19⁺B细胞表面IL-35受体（IL-35R）IL-12Rβ2、gp130和IL-27Rα的表达;FCM检测CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg、CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg和CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞的百分比;FCM检测CD4⁺T、CD19⁺B细胞内p-STAT1、p-STAT3、p-STAT4和IL-10的表达。结果:1.（1）AS患者外周血CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg细胞比例低于正常对照组,且AS高活动组低于AS低活动组及正常对照组（P<0.01）。（2）AS患者外周血CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg、CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞比例均低于正常对照组,且AS高活动组低于AS低活动组及正常对照组（P<0.05）;AS低活动组患者外周血CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞比例低于正常对照组（P<0.01）。（3）与正常对照组相比较,AS组、AS低活动组及AS高活动组患者外周血IL-10、IL-35、EBI3 m RNA和p35 m RNA表达水平均显著降低（P<0.05）。（4）AS患者外周血CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg、CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg、CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞比例、IL-10和IL-35水平与BASDAI评分呈负相关,IL-10水平与CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg和CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞比例呈正相关,IL-35水平与CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg、CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg、CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞比例和IL-10水平亦呈正相关（P<0.05）。2.（1）CD4⁺T细胞表面表达IL-12Rβ2、gp130和IL-27Rα,CD19⁺B细胞表面表达IL-12Rβ2和IL-27Rα,不表达gp130。（2）与未加入r IL-35组相比,加入r IL-35组CD4⁺T细胞表面IL-12Rβ2和gp130表达明显上调,CD19⁺B细胞表面IL-12Rβ2和IL-27Rα表达亦明显上调（P<0.01）。（3）与未加入r IL-35组相比,加入r IL-35组CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg和CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg比例增加（P<0.05）。（4）与未加入r IL-35组相比,加入r IL-35组CD4⁺T细胞内p-STAT1、p-STAT4、IL-10以及CD19⁺B细胞内p-STAT1、p-STAT3、IL-10表达上调,上清液中IL-10表达水平也显著增加（P<0.05）。结论:（1）随着疾病活动度的增加,AS患者外周血CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg、CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg、CD19⁺CD24^hiCD27⁺Breg细胞比例和IL-10、IL-35、EBI3m RNA、p35m RNA水平明显降低。（2）AS患者外周血Treg细胞、Breg细胞和IL-10水平下降与IL-35水平降低密切相关。（3）外源性IL-35能促进AS患者CD4⁺T细胞和CD19⁺B细胞分泌IL-10,提高CD4⁺CD25^hiCD127^loTreg、CD19⁺CD24^hiCD38^hiBreg、CD4⁺IL-10⁺T和CD19⁺IL-10⁺B细胞比例,为AS的治疗提供了新的靶点。