论文部分内容阅读
目的:探讨血浆外泌体中长链非编码RNA（LncRNA）H19、MALAT1对乳腺癌患者的诊断价值,以便进一步深入了解乳腺癌的发展机制,从而为乳腺癌早期筛查、早期诊断、早期预防、分子靶向治疗提供理论依据。方法:收集2016年8月至2017年4月在西南医科大学附属医院收治的首次确诊为乳腺癌患者女性50例,在患者未接受手术、放化疗等任何处理之前采集静脉血,选取同期在本院期间确诊为乳腺良性病变者的女性患者、健康体检女性患者各25例,采血前未经任何治疗,提取其血浆外泌体中的RNA,利用紫外分光光度法对血浆外泌体内RNA的纯度OD值和完整性进行测试,运用实时荧光定量（qRT-PCR）的方法检测其血浆外泌体中长链非编码RNA（LncRNA）H19、MALAT1的表达情况,使用SPSS20.0软件对其表达差异进行统计学分析,分析患者的临床病理参数与乳腺癌血浆外泌体H19、MALAT1表达水平的相关性,随后制作出受试者工作特性曲线（ROC曲线）:实验组为初诊的乳腺癌患者,而对照组为同期的乳腺良性病变者和健康体检者,对差异表达的H19、MALAT1进行ROC曲线分析,评价乳腺癌血浆外泌体中长链非编码RNA（LncRNA）H19、MALAT1对乳腺癌的诊断价值。结果:1.RT-PCR验证结果:采用SPSS 20.0软件中的秩和检验对三组样本进行分析并进行两两比较。1.1 H19在乳腺癌外泌体组与乳腺良性病变者组、健康对照组的比较中,χ2=64.277,P<0.001,差异有显著统计学意义。两两比较结果显示:（1）乳腺癌外泌体组与乳腺良性病变组比较,Z=-5.162,P<0.001,差异具有统计学意义;（2）乳腺癌外泌体组与健康对照组比较,Z=-5.578,P<0.001,差异具有统计学意义;（3）乳腺良性病变组与健康对照组比较,Z=-1.504,P=0.133,差异无统计学意义。1.2 MALAT1在乳腺癌外泌体组与乳腺良性病变者组、健康对照组的比较中,χ2=10.245,P=0.006,差异具有统计学意义。两两比较结果显示:（1）乳腺癌外泌体组与乳腺良性病变组比较,Z=-2.877,P=0.004,差异具有统计学意义;（2）乳腺癌外泌体组与健康对照组比较,Z=-2.304,P=0.021,差异具有统计学意义。（3）乳腺良性病变组与健康对照组比较（Z=-0.262,P=0.793>0.05）,差异无统计学意义。2.对50例乳腺癌患者病理资料统计分析发现血浆外泌体H19表达水平与ER、PR、c-erbB-2、Ki-67、P120（膜）及淋巴结转移具有相关性（P〈0.05）,而与肿瘤病理类型、年龄、TNM分期无相关性。血浆外泌体MALAT1表达水平与ER、PR、c-erbB-2、Ki-67、及淋巴结转移相关（P均〈0.05）,而与年龄、病理类型、TNM分期、P120（膜）无相关性。3.ROC曲线结果:利用SPSS20.0绘制ROC曲线,进行ROC曲线下面积（AUC）分析:乳腺癌外泌体组H19 AUCROC=0.882,敏感度和特异度分别为70%和96%,乳腺癌外泌体组MALAT1 AUCROC=0.684,敏感度和特异度分别为84%和52%。而血浆外泌体H19联合MALAT1 AUCROC=0.896,敏感度和特异度分别为74%和92%。结论:乳腺癌血浆外泌体可稳定表达H19、MALAT1,且血浆外泌体中高表达的H19、MALAT1可能作为乳腺癌早期筛查、临床监控的一个新型生物学标志物。