大麦(Hordeum vulgare L.)属禾本科植物,主要用于制造啤酒及饲用。其具有抗旱、耐盐碱等特性。随着全球气候与生态环境的日益恶化,土壤盐碱化和干旱仍然是限制大麦生长的两个主要环境因素。采用基因工程手段,培育高抗旱耐盐性大麦新品种已成为大麦栽培的迫切要求。而受体材料是遗传转化的基础,寻求一种来源广泛、取材方便、受基因型和季节限制小、高频再生的体系对于有效地开展大麦转基因研究具有重要意义。因此,本实验通过建立大麦茎尖再生体系,利用农杆菌介导法将盐生草(Halogeton glomeratus)Na~~+/H~~+逆向转运蛋白(NHX)HgNHX1基因导入大麦,获得转基因阳性植株并对转基因大麦T1代植株进行抗逆性分析。主要研究结果如下:1.以栽培中常用品种甘啤3号、甘啤4号和甘啤6号为材料,研究了大麦茎尖高频再生体系影响因素,其中种子浸泡在30%的硫酸中,30℃、180 r/min摇动1 h为去除颖壳最佳方法;75%的乙醇处理1.5 min~~+2%的NaClO处理15 min为较好的灭菌方法;3 d苗龄、茎基部2 mm处切段效果最好;3 mg/L 2,4-D有利于愈伤组织诱导,参试品种中甘啤4号再生能力较强。2.利用盐生草HgNHX1对大麦进行遗传转化,采用农杆菌介导法,真空渗透处理5 min,超声波处理30 s,100 r/min摇动侵染30 min的瞬时转化率较高,获得了抗性再生植株23株,PCR检测阳性植株数7株,并获得了T1代种子。3.对T1代转基因大麦植株抗逆性分析发现,在干旱、盐胁迫下,HgNHX1基因在大麦中表达丰度增高,转HgNHX1基因大麦植株的耐盐性不明显,而抗旱性增强。