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金钗石斛叶是名贵中药金钗石斛的叶子,目前尚未得到有效利用。为了促进金钗石斛资源的充分利用,本研究在对金钗石斛叶基本组分分析的基础上,首先评价了金钗石斛叶水溶性粗多糖的体外生物活性,探讨了不同干燥方法对石斛叶品质的影响,然后对其活性成分多糖作了进一步研究。在研究中首先筛选了金钗石斛叶水溶性多糖的最佳提取和脱色工艺,然后通过脱蛋白和柱层析分离纯化得到均一的多糖组分DNLP-W1,最后研究了DNLP-W1的理化性质和体外生物活性。主要研究内容和结果如下:(1)分析了金钗石斛叶的主要成分,金钗石斛叶中水含量为85.37%,水溶性总糖、粗蛋白、粗脂肪、灰分、黄酮、石斛碱的含量分别为12.09%、9.56%、7.89%、3.74%、1.35%、0.15%(以干物质计)。(2)比较了微波、热风、真空、冷冻干燥方法对金钗石斛叶多糖的影响。金钗石斛叶经真空冷冻干燥、真空干燥、热风干燥及微波干燥后总多糖质量分数分别为3.11%、3.02%、2.81%和2.74%。(3)采用响应面优化金钗石斛叶水溶性多糖提取工艺,在温度为82℃,料液比为1:30(g/mL)、提取时间为3.3 h的提取条件下,金钗石斛叶粗多糖提取物的得率为10.27%,提取物的多糖含量为38.64%。(4)采用响应面优化金钗石斛叶水溶性多糖脱色工艺,在D301树脂用量为0.33g/m L、脱色时间为3.4 h、脱色温度为47℃的条件下,得到金钗石斛叶多糖的脱色率为92.34%,多糖的保留率为74.67%,脱色后的多糖样品中多糖含量为51.32%。(5)采用Sevag脱蛋白法,Cellulose DE-52和Sephadex G-100柱层析对金钗石斛叶粗多糖进行分离纯化,得到均一的水洗多糖组分DNLP-W1。DNLP-W1的得率为12.04%,多糖含量为93.74%,相对分子量为4.17×104,由阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖、木糖4种单糖(摩尔比为:1.00:1.33:1.27:14.05)组成,特征分解温度为256.6℃。(6)通过对α-葡萄糖苷酶、α-淀粉酶的抑制活性及DPPH、ABTS+自由基的清除能力评价了金钗石斛叶粗多糖及其纯化组分DNLP-W1的体外生物活性。结果表明,当多糖样品浓度为10 mg/mL时,粗多糖和DNLP-W1对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶的抑制率分别为45.63%、39.91%和36.74%、31.06%。当多糖样品浓度为2.5 mg/mL时,粗多糖和DNLP-W1对DPPH、ABTS+自由基的清除率分别为68.24%、74.01%和56.74%、40.22%。