HSV-1在正常人的虹膜、睫状体、视网膜潜伏的初步研究

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背景与目的:眼部主要是单纯疱疹病毒Ⅰ型(Herpes simplex virus,HSV-1)感染,以往的研究发现HSV-1 病毒主要潜伏在三叉神经节、颈交感神经节等部位,后来在鼠的虹膜、睫状体、颈上神经节、人的角膜、杏仁体、海马、脑干等部位发现HSV-1,近年来在睫状神经节、翳状胬肉也发现了HSV-1。已经证实角膜是HSV-1 的另一个眼部潜伏部位。三叉神经支配角膜、虹膜、睫状体。虹膜、睫状体是否同角膜一样存在HSV-1 潜伏,目前尚不明确;HSV-1 可引起急性视网膜坏死综合征,视网膜是否是HSV-1 潜伏的部位,目前缺乏研究。本研究采用细胞培养、免疫组化和PCR 的方法,探讨正常人虹膜、睫状体、视网膜是否存在HSV-1 的DNA 和潜伏相关转录本功能片段(Latency associated transcript,LAT)。方法:采用正常健康志愿者捐献的新鲜眼球20 个,在穿透性角膜移植手术后的供体眼球上,取1/3 眼球组织进行免疫组化染色,排除HSV-1 急性感染。从免疫组化染色阴性的眼球中取出剩余的虹膜、睫状体、视网膜,分别将每个眼球的虹膜、睫状体、视网膜组织的1/3 进行离心,取上清液与Vero 细胞共培养,并盲传三代,检查有无活性HSV-1 存在;另外2/3 组织提取DNA 作PCR 和凝胶电泳检测有无HSV-1 的DNA和LAT。结果: 1. 20 个标本免疫组化染色皆阴性,无HSV-1 急性感染。2. Vero 细胞分别与虹膜、睫状体、视网膜组织上清液共培养,并盲传三代结果为阴性,未观察到细胞病理学改变,对照组有阳性表现,表现为Vero 细胞气球样变、核固缩、多核巨细胞甚至细胞悬浮死亡。3. PCR 检测20 个人的虹膜、睫状体、视网膜标本中,4 个睫状体标本的HSV-1DNA阳性,3 个视网膜标本的HSV-1DNA 阳性,其他虹膜、睫状体、视网膜标本PCR 检测HSV-1 DNA 阴性。所有的虹膜、睫状体、视网膜标本HSV-1 LAT 结果阴性。结论:正常人眼睫状体、视网膜存在HSV-1 DNA,提示在睫状体、视网膜可能有HSV-1 的潜伏,成年人单纯疱疹病毒性睫状体炎、急性视网膜坏死的发生可能与上述
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