降温对凡纳滨对虾细胞凋亡的影响及其营养调控

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温度是影响对虾生长存活的重要环境因子,而对虾的血细胞具有携氧、免疫等重要生理功能。利用流式细胞术、酶活力检测和基因表达研究了水温从适宜对虾生长的26℃以每小时1℃的速率下降到17℃对凡纳滨对虾血细胞凋亡的影响,并研究了在饲料中分别添加不同浓度的L-精氨酸(0、10、20和30 g/kg)、L-肉碱(0、500、1000和2000 mg/kg)和大豆异黄酮(0、500、1000和2000 mg/kg)对低温诱导的细胞凋亡的影响。研究结果如下:  1.研究水温下降对凡纳滨对虾血细胞凋亡的影响。结果显示,当水温从26℃开始以每小时1℃的速率下降到17℃,凡纳滨对虾的血细胞活性氧含量显著上升,血清过氧化氢酶的活力和总抗氧化能力显著下降,血清丙二醛含量显著增加,血细胞的Caspase-3、Cathepsin B和Cathepsin C基因表达量显著提高,胞内钙离子浓度显著上升,线粒体膜电位显著下降,Caspase-9和Caspase-3酶活力显著提高,细胞凋亡率显著增加,血细胞总数显著减少(P<0.05)。  2.研究饲料添加L-精氨酸对降温诱导凡纳滨对虾细胞凋亡的影响。结果显示,当水温从26℃开始以每小时1℃的速率下降到17℃,饲料中添加10和20 g/kgL-精氨酸组的凡纳滨对虾血清总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力、线粒体膜电位和血细胞总数显著高于不添加L-精氨酸组(p<0.05),而活性氧含量、血清丙二醛含量、血细胞凋亡率、胞内钙离子浓度、Caspase-3和Caspase-9酶活力、Caspase-3基因表达量、Cathepsin B和Cathepsin C基因表达量均显著低于不添加L-精氨酸组(p<0.05)。饲料中添加10和20 g/kgL-精氨酸能提高温度下降时的凡纳滨对虾抗氧化能力,抑制血细胞凋亡。  3.研究饲料添加L-肉碱对降温诱导凡纳滨对虾细胞凋亡的影响。结果显示,当水温从26℃开始以每小时1℃的速率下降到17℃,饲料中添加500和1000mg/kg L-肉碱组的凡纳滨对虾血清总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力、线粒体膜电位和血细胞总数显著高于不添加L-肉碱组(p<0.05),而活性氧含量、血清丙二醛含量、血细胞凋亡率、胞内钙离子浓度、Caspase-3和Caspase-9酶活力、Caspase-3基因表达量、Cathepsin B和Cathepsin C基因表达量均显著低于不添加L-肉碱组(p<0.05)。饲料中添加500和1000 mg/kg L-肉碱能提高温度下降时的凡纳滨对虾抗氧化能力,抑制血细胞凋亡。  4.研究饲料添加大豆异黄酮对降温诱导凡纳滨对虾细胞凋亡的影响。结果显示,当水温从26℃开始以每小时1℃的速率下降到17℃,饲料中添加500、1000和2000 mg/kg大豆异黄酮组的凡纳滨对虾血清总抗氧化能力、总超氧化物歧化酶活力、过氧化氢酶活力、线粒体膜电位和血细胞总数显著高于不添加大豆异黄酮组(p<0.05),而活性氧含量、血清丙二醛含量、血细胞凋亡率、胞内钙离子浓度、Caspase-3和Caspase-9酶活力、Caspase-3基因表达量、Cathepsin B和Cathepsin C基因表达量均显著低于不添加大豆异黄酮组(p<0.05)。饲料中添加500、1000和2000mg/kg大豆异黄酮均能提高温度下降时的凡纳滨对虾抗氧化能力,抑制血细胞凋亡。
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