纳豆激酶(nattokinase简称NK)是一种枯草芽孢杆菌蛋白激酶，是在纳豆发酵过程中由枯草芽孢杆菌产生的一种丝氨酸蛋白酶，该酶具有强烈溶栓活性。本研究的目的是克隆前纳豆激酶原基因，实现其在大肠杆菌中的表达，并对其表达条件进行研究。方法是从枯草芽胞杆菌中分离纯化基因组DNA作为模板，通过PcR扩增前纳豆激酶原基因，将其克隆到质粒pUCl9中，构建重组克隆质粒pNK并转化大肠杆菌DH5 α，序列分析结果表明，所克隆片段全长1152bp，与Gerlebank中已报道序列相比较，同源性达到100[％]。将目的基因片段分别与表达载体pBV220和pET30a连接，构建重组表达质粒pBNK和pENK，分别转化大肠杆菌HBlol和BL21(DE3)，用温度诱导转化菌pBNK6-HBI01，表达产物经SDS-PAGE电泳观察到了特异条带，不同诱导温度、时间及培养基比较实验结果显示，转化菌pBNK6-HBl01在BL培养基中30℃培养，42℃诱导7小时表达量达到最大，约占菌体总蛋白的25％。用IPTG诱导转化菌pENKl08-BL21(DE3)，表达产物经SDS-PAGE电泳观察到了特异条带，Western b10t检测到了目的蛋白。转化菌pENKl08-BL21(DE3)在BL培养基中37℃培养，1mM IPTG诱导4小时表达量达到最大，约占菌体总蛋白的31[％]。