肠内营养制剂是一类组成复杂,含有多种营养元素的制剂。对其中含有的主要营养成分进行含量测定研究,可以对肠内营养制剂的质量控制提供数据支持,便于肠内营养制剂的申报、上市、检验和临床应用。本文根据氨基酸型肠内营养粉剂XNX中主要营养成分的组成,如氨基酸、维生素和微量元素等以及这些成分的含量范围,建立相关的含量测定方法对其进行定量研究,更好地为肠内营养剂质量控制提供方法依据。共分为以下三个部分：1、XNX粉剂中氨基酸的含量测定方法研究待研究的氨基酸型肠内营养粉剂XNX中共含有19种人体必需和非必需氨基酸。根据氨基酸的结构不同,使用两种方法对其进行含量测定方法研究。18种伯氨基酸的测定使用邻苯二甲醛为衍生化试剂,建立柱前衍生-高效液相色谱法进行测定。Agilent C18色谱柱(150mm×4.6mm,5.0μm),流动相为甲醇-50mmol·L-1醋酸钠缓冲液(pH5.6),采用梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1,柱温30℃；FLD荧光检测,激发波长340nm,发射波长460nm。XNX粉剂样品经0.1mol/L盐酸溶液超声提取后,与衍生化试剂反应,取20μL进样分析。本法线性关系良好,18种氨基酸的线性回归系数范围在0.9988～0.9999；平均回收率在94.12%～113.73%,日间、日内精密度RSD均<10%；样品溶液在24h内稳定。该部分研究成果已撰写论文发表在《中国新药与临床杂志》上。仲胺基的脯氨酸使用氯甲酸-9-芴基甲酯(FMOC-Cl)为衍生化试剂,建立柱前衍生-高效液相色谱法进行测定。色谱柱采用Agilent C18(150mm×4.6mm,5.0μm)柱,流动相为乙腈-50mmol.L-1醋酸钠缓冲液(pH4.2),梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,柱温30℃；FLD荧光检测,激发波长263nm,发射波长315nm。XNX粉剂样品经0.1mol/L盐酸溶液溶解稀释后,超声提取,在室温条件下与衍生化试剂反应15min,反应终止并取20μL进样分析。脯氨酸在质量浓度0.1～1μg/mL内线性关系良好,r=0.9996；平均回收率109.42%～112.72%,日间、日内精密度RSD均<7%；样品溶液在24h内稳定。该部分研究成果已撰写论文发表在《中国临床药学杂志》上。两种方法灵敏、简便、专属性强,能对氨基酸型肠内营养粉剂XNX中的氨基酸进行准确的定量分析,避免制剂中其他组分的干扰。2、XNX粉剂中维生素的含量测定方法研究本文选择了氨基酸型肠内营养粉剂XNX中维生素E、维生素A、维生素B1、B2、B6和肉毒碱进行含量测定方法研究。维生素E的含量测定方法：色谱柱：Dikma Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm)；流动相：甲醇：乙腈=95：5(V/V)；荧光检测波长：激发波长292nm,发射波长340nm；流速1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL。将XNX粉剂中的维生素E用95%乙醇提取后,用氢氧化钾进行碱化水解,测定水解后的维生素E醇。维生素E在0.3～12μg/mL范围内线性关系良好,回归系数0.9997,日内日间精密度均小于9%,平均回收率在99.83%-108.14%,溶液在8h内稳定。该部分研究成果已撰写论文发表在《中国临床药学杂志》上。维生素A的含量测定方法：色谱柱：Dikma Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm)；流动相：甲醇：乙腈=95：5(V/V)；紫外检测波长：λ=325nm；流速1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL。维生素A用甲醇超声提取后测定。维生素A在32.5-650ng/mL范围内线性关系良好,回归系数0.999,日内日间精密度均小于8%,平均回收率在95.09-96.91%。维生素B1&B2的含量测定方法：色谱柱：Dikma Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm);流动相：甲醇：5mM庚烷磺酸钠(含0.5%冰乙酸,0.1%三乙胺)=30：70(V/V)；紫外检测波长为260nm；流速1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL。维生素B1&B2用去离子水超声提取后测定。维生素B1&B2在0.5-4μg/mL范围内线性关系良好,回归系数分别为0.999和0.9991,日内日间精密度均小于9%,平均回收率在98.34-107.68%。维生素B6含量测定方法：色谱柱：Dikma Diamonsil C18(150mm×4.6mm,5μm)；流动相：甲醇：5mM庚烷磺酸钠(含有0.5%冰醋酸和0.1%三乙胺)=28：72(V/V)；λex=295nm,λem=397nm；流速1.0mL/min；柱温：30℃；进样量：20μL。维生素B6用去离子水超声提取后测定。维生素B6在0.1-1μg/mL范围内线性关系良好,回归系数分别为0.9999,日内日间精密度均小于4%,平均回收率在98.31-101.0%。肉毒碱含量测定方法：建立酶解法测定XNX粉剂中的肉毒碱含量的方法。肉毒碱用去离子水超声提取,用紫外分光光法测定酶解反应前后的吸光度值。肉毒碱在4-16μg/mL范围内线性关系良好,回归系数分别为0.9995,平均回收率在85.84-106.82%。上述方法灵敏、简便、专属性强,能对氨基酸型肠内营养粉剂XNX中的各种维生素进行准确的定量分析,避免制剂中其他组分的干扰。3、XNX粉剂中微量元素的含量测定方法研究本文选择了氨基酸型肠内营养粉剂XNX中的金属微量元素和碘离子进行含量测定方法研究。金属微量元素的含量测定方法：用原子吸收分光光度法测定XNX粉剂中的铜、铁和锌的含量。铜、铁、锌在各自线性范围内线性关系良好,回归系数在0.9928-0.9999,精密度和方法回收率良好。能够准确、快速地测定XNX粉剂中的铜、铁、锌。碘离子的含量测定方法：建立离子选择性电极测定XNX粉剂中的碘离子含量的方法。XNX粉剂经过高温破坏后,提取出碘离子,用电位法测定其的含量。碘离子在0.07-0.2ug/mL范围内线性关系良好,回归系数分别为0.9970,日内精密度小于3%,平均回收率在96.5%。方法准确、灵敏,能够快速地测定XNX粉剂中的碘离子含量。