益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌MMP-9影响的研究

来源 :辽宁中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhuyun
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目的:本实验通过建立慢性心衰大鼠模型,观察益气活血复方对慢性心衰大鼠心肌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。从基因、组织形态学等方面,研究中药复方对慢性心衰的作用机制,为中医药防治慢性心衰提供科学依据。材料与方法:1.利用冠状动脉结扎的方法,同时让大鼠做力竭式游泳并减食,使其饥饿,制造慢性心衰大鼠模型,然后通过多普勒超声心动图检测,若左室射血分数≤60%,并伴有大鼠精神萎靡、毛色无光,列入实验对象。2.将造成慢性心衰的大鼠模型随机分为中药组、西药组、模型组三组,并设立空白对照组,四组中每组8只大鼠,空白对照组为未经冠脉结扎的正常大鼠。空白对照组和模型组大鼠不给药,常规等容积灌胃蒸馏水,每次3ml,每日2次;各给药组的大鼠模型按剂量(g/Kg)=人的给药剂量(g)×系数(0.018)/所求动物体重(Kg)的人鼠剂量换算公式给药。中药组(益气活血复方)每天每公斤体重9.2g生药;西药组(赖诺普利片)每天每公斤体重1.5mg生药。实验周期为6周,6周后将全部大鼠麻醉处死,取其心肌组织待检。3.将取出的大鼠心肌组织利用实时荧光定量PCR技术和HE染色方法进行检测,并用免疫组化法光镜下观察心肌组织,比较四组间MMP-9和心肌组织形态学在慢性心衰大鼠心肌中的变化情况。结果:1.慢性心衰动物模型组MMP-9mRNA表达明显升高,是空白对照组的2.606倍(与空白对照组比较P<0.01),有显著的统计学差异;经药物干预后,两治疗组MMP-9mRNA明显下降(与模型组比较P<0.05);但西药组、中药组各组间疗效无差异(P>0.05)。2.空白对照组心肌细胞排列紧凑规整,润盘、横纹清晰,横纵切面观察,形态结构一致,心肌细胞核位于心肌细胞边缘,形态、大小正常,肌原纤维(或纤维)排列有序,无断裂及缺损、空白区。模型组心肌细胞交织成网,看不到横纹,心肌细胞核、心肌纤维排列紊乱,断裂及缺失,心肌细胞核固缩,出现空白区,异染色质呈现团块状,相邻细胞闰盘间隙增宽。西药组心肌细胞排列较规整,可见到横纹,大部分心肌细胞核形态、大小、基本正常,位于心肌细胞边缘,肌原纤维排列较有序,仍可见有断裂及缺损及空白区着色不均匀。中药组心肌细胞排列较规整,可见横纹,可见心肌细胞核较为固缩呈圆形,位于心肌细胞边缘,肌原纤维排列较有序,仍可见有断裂及缺损及空白区。3.慢性心衰模型组MMP-9利用免疫组化法,经软件分析后模型组平均灰度值为420.16±112.38(与空白对照组比较P<0.01);西药组效果最为明显为120.74±38.62(与模型组比较P<0.01);中药组为139.87±35.73(与模型组比较P<0.01),中药组与西药组相比P>0.05,无统计学意义。结论:1.利用冠状动脉结扎的方法,同时结合力竭式游泳、减食等手段,通过多普勒超声心动图检测与观察到的大鼠行为学变化,证明此次慢性心衰大鼠造模成功。2.益气活血复方能够抑制慢性心衰大鼠心肌组织中MMP-9表达;益气活血复方可抑制或逆转心室重构,阻止心衰进一步发展。3.通过本实验数据可以证明益气活血复方治疗慢性心衰是安全、可行、有效的,其疗效与西药赖诺普利相当。
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