红系发育相关基因(erythoiddevelopassociatedgene，EDAG)是本实验室自行分离克隆的一种特异表达于造血组织和细胞的新基因(中国专利申请号：01118268.8公开号：CN1388130A)。EDAG基因是从4月龄人胎肝组织与成年肝组织的差异表达基因EST库中分离到的一种新基因片段，经5’RACE获得其全长为2166bp的cDNA。该基因定位于染色体9q22，编码484个氨基酸组成的蛋白质，与小鼠Hemogen及大鼠RP59基因同源。研究表明，EDAG高表达在胚胎组织和造血组织中，具有恶性转化活性，与维持细胞的未分化状态有关。高表达EDAG可使Ba/F3细胞存活能力增强，并可通过活化NF-κB上调c-myc、Bcl-xl、Bcl-2等增强细胞抗凋亡能力。转基因小鼠的研究表明在小鼠造血细胞中过表达EDAG可导致造血干细胞增殖分化紊乱，突出表现在髓系造血增强，淋巴系造血抑制，并出现典型的髓系增生综合征，表明EDAG是一种参与造血发育与分化调控的重要基因。 目前EDAG调控细胞增殖、分化及凋亡的分子机制尚不明确。对EDAG蛋白的结构进行生物信息学分析发现，在其N端有一个典型的coiled-coiled结构域，此结构域多存在于单聚体蛋白中，且高度保守，通常介导蛋白与蛋白之间的相互作用。这提示我们EDAG很可能是通过与其他重要蛋白的相互作用发挥功能。 本研究制备了EDAG及THAP11多克隆抗体，检测了EDAG及THAP11的蛋白水平表达情况，发现EDAG与THAP11的表达有相似性，并通过共定位及Co-IP验证了二者的相互作用。初步探索THAP11对EDAG转录活性的影响，发现THAP11可增强EDAG的转录活性。通过荧光蛋白融合表达及Wesrtemblot分析可诱导表达EDAG稳定细胞系中EDAG的分布两种方法确定EDAG定位在细胞核中，为认识EDAG的作用机理提供思路。利用IP-MS方法检测到EDAG的相互作用蛋白HSP70，在K562细胞中验证二者的生理性相互作用，并初步探讨了HSP70对EDAG表达的影响。 EDAG及THAP11多克隆抗体的制备为EDAG及THAP11的功能研究提供重要工具；建立可诱导表达EDAG的稳定细胞系为EDAG功能的研究提供重要的细胞模型；验证THAP11及HSP70与EDAG的相互作用对于阐述EDAG调控造血的分子机制具有重要意义。