【摘 要】
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植酸酶可作为一种新型饲料添加剂,是一种能水解植酸及其盐类的磷酸酶类,能将植酸磷(六磷酸肌醇)降解为肌醇和无机磷酸.该文对基因工程菌毕赤酵母表达重组植酸酶的发酵条件在
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植酸酶可作为一种新型饲料添加剂,是一种能水解植酸及其盐类的磷酸酶类,能将植酸磷(六磷酸肌醇)降解为肌醇和无机磷酸.该文对基因工程菌毕赤酵母表达重组植酸酶的发酵条件在摇瓶中进行优化,实验中发现植酸酶表达的最适诱导时间为60h,最适pH为4.6,最适甲醇浓度为8g/L,最适磷酸盐和硫酸铵初浓度分别为13.6g/L和50g/L.然后在摇瓶实验的基础上,对毕赤酵母表达植酸酶的发酵过程进行了放大研究,在5L和50L发酵罐上分别得到最大植酸酶酶活为800000U和860000U.实验还研究了毕赤酵母从生长向表达的过渡阶段的关键酶活性发现,在甲醇诱导的开始阶段代谢流存在一个从糖酵解途径和三羧酸循环向甲醛途径和磷酸戊糖途径过渡的重新分配过程.并根据酶活结果与发酵中的参数,对甲醇在毕赤酵母中的代谢流分布进行分析,发现在诱导过程,由于菌体合成大量氨基酸,需要大量的NADPH,所以磷酸戊糖途径的代谢通量增加,另外,此时由于甲醇浓度的升高,使得通往甲醛途径的通量增加,即实验结果显示甲醛途径的主要生理作用可能是解毒作用.
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