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随着水产养殖的规模化和集约化，水产动物的健康养殖面临着挑战。而抗生素和抗菌药物长期使用，造成诸如细菌抗药性、耐药基因的转移、水产品中药物残留等不良后果，直接或间接威胁人类健康。益生菌即微生态制剂，是一类能够调节水产动物肠道微生态平衡，改善水体环境，增强机体免疫，促进消化、抵御病原菌侵袭的活的微生物。益生菌的使用是安全有效环保的，因此研究和开发水产用益生菌菌株对促进水产养殖有着重要的意义。丁酸梭菌(Clostridium butyricum)，即丁酸梭菌，常作为益生菌用来防治由于多种因素引起的人和动物的腹泻、肠炎等疾病。本次实验研究丁酸梭菌在体外粘附抑制鱼常见病原菌的情况，及其对鮸鱼肠道生理的影响。试验分三部分：(一)分离和培养鮸鱼肠道上皮细胞(intestinal epithelial cell，IEC)，建立肠道上皮细胞的研究模型；(二)丁酸梭菌在IEC模型上的粘附，抑制病原菌粘附作用，及细胞安全性评价；(三)通过饲喂实验，观察其对鮸鱼肠道组织形态、消化酶、肠内短链脂肪酸、肠壁微生物的影响。主要研究结果如下：1采用Ⅳ型胶原酶、Ⅰ型胶原酶和EDTA消化鱼肠道中段分离IEC细胞，以贴壁时间的不同纯化IEC，并缩短处理时间，即可获得有活力的、较纯的IEC，呈单层生长，可作为试验的模型。2丁酸梭菌能够粘附于肠上皮细胞，粘附率8.03％，且不侵袭细胞，粘附后对细胞损伤相较低。丁酸梭菌能降低鳗弧菌的粘附率，其中竞争试验，粘附率降低6.71％；排斥试验，粘附率降低8.27％；替代试验，粘附率降低4.47％。3通过饲喂丁酸梭菌，能提高鱼的消化酶活性，影响肠内短链脂肪酸，其中丁酸尤为明显，中后肠浓度分别增加了2.09mmol／kg、2.12mmol／kg。肠绒毛高度增高，中肠提高了28.81μm，后肠提高了34.23μm。上皮细胞上微绒毛高度增高，中肠和后肠分别增高了1.89μm，1.09μm。电镜下观察，可见后肠肠壁上细菌定植。结论：丁酸梭菌具有粘附能力，不存在致病因素，能竞争的抑制肠内致病原微生物，改善肠道消化生理，增加肠内SCFA，增强肠内消化酶活性，提高肠道绒毛高度。采用IEC模型，体外研究丁酸梭菌的粘附及抑制，在一定程度上能够反映体内的菌群互作，具有一定的参考价值。