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近年来,糖尿病的发病率逐年增加,与心血管疾病、恶性肿瘤一起成为威胁人民健康的多发病,致残率、致死率较高,并且超过85%为2型糖尿病。2型糖尿病主要以血糖升高、胰岛素抵抗以及胰岛β细胞功能受损等为主要特征,如何降低血糖、保护胰岛、促进β细胞分泌胰岛素是治疗2型糖尿病的关键。丝胶是分子量为10-300KD,由18种氨基酸组成的高分子水溶性蛋白。丝胶的含量约占蚕丝总量的25%,但在缫丝和精炼时极大部分被除去,造成了极大的浪费。本课题组前期研究发现,丝胶具有良好的降血糖作用,但具体机制尚不清楚。本研究采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素诱导的方法建立2型糖尿病大鼠模型,探讨丝胶对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素PI3K/Akt信号转导通路的干预作用,为治疗和防治糖尿病并发症开辟新途径。目的:通过观察丝胶对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素受体(Insulin Receptor,IR)、胰岛素受体底物-1(Insulin Receptor Substrate-1,IRS-1)、磷脂酰肌醇-3-激酶(Phosphatidylinositol 3-Kinase,PI3K)和蛋白激酶B(Protein Kinase B,Akt/PKB)表达的作用,探讨丝胶对2型糖尿病大鼠胰腺胰岛素PI3K/AKT信号转导通路的作用及可能机制。方法:1.60只SPF级雄性SD大鼠随机分为5组:正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DM组)、丝胶治疗高剂量组(HS组)、丝胶治疗低剂量组(LS组)、阳性对照组(PC组),每组12只。采用高脂高糖饲料联合链脲佐菌素(35mg/kg,2次)腹腔注射的方法建立大鼠2型糖尿病模型,以空腹血糖≥11.1mmol/L作为成模标准。待模型成功建立后,HS组大鼠给予2.4g/kg的丝胶连续灌胃35d,LS组大鼠给予1.8g/kg的丝胶连续灌胃35d,pc组大鼠给予55.33mg/kg的二甲双胍灌胃35d;nc组和dm组大鼠给予同等剂量生理盐水灌胃35d。2.釆用葡萄糖氧化酶法检测各组大鼠的空腹血糖。3.采用elisa法检测大鼠血清胰岛素(insulin,ins)和脂联素(adiponectin,adp)水平。4.采用westernblotting法检测各组大鼠胰腺ir、irs-1、pi3k、akt/pkb蛋白的表达。5.釆用实时定量荧光pcr(real-timefq-pcr)法检测各组大鼠胰腺ir、irs-1和pi3k、akt/pkbmrna的表达。结果:1.各组大鼠的血糖:nc组大鼠的血糖为(10.83±2.03)mmol/l,dm组组大鼠的血糖为(29.45±4.82)mmol/l,明显高nc组(p<0.05);hs组、ls组、pc组大鼠的血糖分别为(13.20±4.09)mmol/l、(13.18±2.30)mmol/l、(10.04±2.29)mmol/l,均明显低于dm组(p<0.05);且hs组、ls组与pc组血糖水平比较,差异无统计学意义(p>0.05)。2.各组大鼠血清ins水平:NC组大鼠血清ins水平为(11.45±1.72)μg/l,dm组大鼠血清ins水平为(7.28±0.58)μg/l,明显低于nc组(p<0.05);hs组、ls组、pc组大鼠血清ins水平分别为(12.65±2.17)μg/l、(13.30±1.64)μg/l、(11.13±0.99)μg/l,均明显高于dm组(p<0.05);且hs组、ls组与pc组血糖水平比较,差异无统计学意义(p>0.05)。3.各组大鼠血清adp水平:NC组大鼠血清adp水平为(70.11±18.08)μg/l,dm组大鼠血清adp水平为(49.36±12.91)μg/l,明显低于nc组(p<0.05);hs组、ls组、pc组大鼠血清adp水平分别为(95.20±26.80)μg/l、(76.77±10.17)μg/l、(83.50±4.63)μg/l,均明显高于dm组(p<0.05);且hs组、ls组与pc组血糖水平比较,差异无统计学意义(p>0.05)。4.各组大鼠胰腺ir的表达:与nc组比较,dm组大鼠胰腺ir蛋白及mrna的表达明显降低(p<0.05);hs组、ls与pc组大鼠胰腺ir蛋白及mRNA的表达较DM组明显升高(P<0.05),且HS组、LS组与PC组血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。5.各组大鼠胰腺IRS-1的表达:与NC组比较,DM组大鼠胰腺IRS-1蛋白及mRNA的表达明显降低(P<0.05);HS组、LS组与PC组大鼠胰腺IRS-1蛋白及mRNA的表达较DM组明显升高(P<0.05),且HS组、LS组与PC组血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。6.各组大鼠胰腺PI3K的表达:与NC组比较,DM组大鼠胰腺PI3K蛋白及mRNA的表达明显降低(P<0.05);HS组、LS组与PC组大鼠胰腺PI3K蛋白及mRNA的表达较DM组大鼠明显升高(P<0.05);且HS组、LS组与PC组血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。7.各组大鼠胰腺Akt的表达:与NC组比较,DM组大鼠胰腺Akt蛋白及mRNA的表达明显降低(P<0.05);HS组、LS组与PC组大鼠胰腺Akt蛋白及mRNA的表达较DM组明显升高(P<0.05);且HS组、LS组与PC组血糖水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:丝胶可通过上调糖尿病模型大鼠胰腺IR、IRS-1、PI3K和AKT的表达,改善糖尿病时胰腺胰岛素PI3K/Akt信号转导通路的异常,从而发挥降低血糖的作用。