论文部分内容阅读
目的:探讨LPS是否通过EGFR途径上调hBD-3表达促进口腔鳞癌转移。
方法:1.采用RT-qPCR和免疫组织化学方法检测79例口腔鳞癌组织和相应的癌旁组织中hBD-3mRNA和蛋白表达,分析其在口腔鳞癌组织的表达与临床病理学参数的相关性。2.用LPS培养口腔癌细胞SCC-250-10小时,采用ELISA、RT-qPCR检测其对SCC-25细胞hBD-3mRNA和蛋白表达的影响;western blot检测其对SCC-25细胞磷酸化EGFR水平的影响;3.用EGFR阻断剂预处理SCC-25细胞30min,然后再用LPS培养6小时,采用ELISA检测EGFR阻断剂对LPS上调肿瘤细胞hBD-3蛋白表达的影响;4.用TLR4拮抗剂预处理SCC-25细胞1h,然后再用LPS培养4小时,采用ELISA检测TLR4拮抗剂对LPS上调肿瘤细胞hBD-3蛋白表达的影响;5.采用趋化实验检测hBD-3蛋白对SCC-25细胞趋化能力的影响;6.用siRNA-hBD-3稳定转染SCC-25细胞,用趋化实验检测siRNA-hBD-3对LPS处理SCC-25细胞趋化功能的影响。
结果:1.hBD-3高表达于口腔鳞癌组织,与口腔鳞癌淋巴转移正相关;2.LPS能显著上调SCC-25细胞hBD-3表达和EGFR磷酸化;3.在给予LPS刺激前,用EGFR抑制剂或TLR4拮抗剂预处理SCC-25细胞,hBD-3分泌显著减少;3.hBD-3蛋白能显著增强SCC-25细胞趋化能力;siRNA-hBD-3能部分阻断LPS的促SCC-25细胞趋化能力。
结论:LPS能通过EGFR途径上调hBD-3表达,促进口腔鳞癌转移。这一研究结果说明在口腔鳞癌细胞,细菌细胞壁成分LPS能上调hBD-3表达,提示细菌和hBD-3的相互作用可能在口腔鳞癌病理生理学中有重要作用。