硫酸右旋糖酐下调β-catenin抑制人胃癌细胞的侵袭和EMT

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目的在低氧条件下,探讨硫酸右旋糖酐(DS)对人胃癌细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的影响,检测DS是否通过影响β-catenin而抑制胃癌细胞的侵袭和EMT。方法本研究分两部分,实验所用细胞系为人胃癌细胞MGC-803,第一部分,将细胞分为两个组:Control组和DS组,通过CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell侵袭实验,检测胃癌细胞增殖、迁移及侵袭的变化。通过免疫荧光、Western blot检测Twist、N-cadherin的表达水平。第二部分,1、将细胞分为两个组,Control组和DS组,通过免疫荧光、q-PCR、Western blot,检测β-catenin、SOX9的表达水平。2、将细胞分为六个组:(1)Control组,(2)DS组,(3)TGF-β1组(该组是为了诱导β-catenin表达),(4)TGF-β1+DS组,(5)XAV939组(该组是为了抑制β-catenin表达),(6)XAV939+DS组,通过显微镜观察各组细胞的生长密度及形态变化。通过Transwell实验,检测胃癌细胞侵袭能力的变化。通过Western blot,检测β-catenin、SOX9、Twist、N-cadherin的表达水平。结果第一部分,1、CCK-8、克隆形成、划痕、Transwell侵袭实验表明,DS抑制了胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P≤0.05)。2、免疫荧光和Western blot实验显示,与对照组相比,DS显著抑制了Twist、N-cadherin的表达(P≤0.05)。第二部分,1、免疫荧光、Western blot、q-PCR实验结果表明,DS能抑制胃癌细胞β-catenin、SOX9的表达(P≤0.05)。2、Transwell实验表明,DS能显著抑制TGF-β1诱导的胃癌细胞的高侵袭(P≤0.05),也能协同XAV939抑制胃癌细胞的侵袭(P≤0.05)。Western blot结果显示,DS能显著抑制TGF-β1诱导的β-catenin、SOX9、Twist、N-cadherin高表达(P≤0.05),也能协同XAV939抑制胃癌细胞β-catenin、SOX9、Twist、N-cadherin的表达(P≤0.05)。结论:1、DS能抑制胃癌细胞的增殖、迁移、侵袭及EMT。2、DS通过下调β-catenin抑制胃癌细胞的侵袭和EMT。
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