铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)为兰科(Orchidaceae)石斛属多年生附生草本植物,又名黑节草。铁皮石斛经烘干加工而成的螺旋状体,称为“铁皮枫斗”。铁皮石斛分布于我国西南和江南各省,多附生于阴湿的树干或岩石缝隙中。由于铁皮石斛自然条件下繁殖率及成活率极低,生长周期长,野生的铁皮石斛已濒临灭绝。近几年,由生物技术的不断发展,人工栽培是铁皮石斛产业发展的必由之路,组织培养成为弥补铁皮石斛资源不足的重要途径。为了更好的完善铁皮石斛种植方法,提高整体种植水平,GAP建设就显得尤为重要。在铁皮石斛生产过程中,试管苗的培育成本较低,对铁皮石斛试管苗成分、药效的研究可以更好的利用这一资源。本文主要内容如下：(1)铁皮石斛试管苗再生体系研究。分别进行了愈伤组织、原球茎、丛生芽和生根的再生植株阶段的培养基筛选,研究了炼苗时间、温度、移栽基质和移栽方式对铁皮石斛试管苗成活率的影响。实验得出1/2MS附加0.4mg/LIBA、1.0mg/L多效唑、10%香蕉汁和2%蔗糖为最佳培养基。炼苗时间在10d,温度为25±2℃时,炼苗效果最佳。碎木块、水苔和树皮作为移栽基质能更稳定的保证铁皮石斛的成活率。经过多次对比实验后得出丛栽的成活率以及生长情况要明显优于单株栽培,也间接证明了铁皮石斛具有群体效应。(2)铁皮石斛试管苗与栽培植株化学成分研究。分别对铁皮石斛试管苗与栽培植株蛋白质、氨基酸和微量元素含量进行了研究：蛋白质含量随种植年限的增加而减少,叶中的蛋白质含量要高于茎中的蛋白质含量,铁皮石斛试管苗中的蛋白质含量要高于栽培植株中蛋白质的含量。氨基酸的组成方面,铁皮石斛试管苗和栽培植株均含有人体的所必须氨基酸,且铁皮石斛试管苗氨基酸的含量也高于铁皮石斛栽培植株。铁皮石斛的微量元素含量较高,其试管苗又明显高于铁皮石斛栽培植株。(3)铁皮石斛试管苗与栽培植株药理药效研究。分别分析了铁皮石斛试管苗与栽培植株抗癌细胞作用和提高机体免疫力作用。体外实验中通过细胞毒性实验(MTT)验证：铁皮石斛试管苗与栽培植株乙醇提取物(256mg/L)对人乳腺癌细胞(MCF-7)的抑制率分别为57%和61%,阳性对照组(五氟尿嘧啶50mg/L)为72%,表明铁皮石斛具有明显的抑制癌细胞的作用。MCF-7凋亡检测中,铁皮石斛试管苗乙醇提取物(256mg/L)处理组的凋亡率为15.00%,栽培铁皮石斛乙醇提取物(256mg/L)处理组凋亡率为18.78%,阳性对照组(五氟尿嘧啶50mg/L)为38.20%,阴性对照组为0.38%。结果表明被铁皮石斛抑制的癌细胞为细胞凋亡。MCF-7的凋亡与活性氧相关性检测中,空白对照组的平均荧光强度为70,铁皮石斛试管苗组的平均荧光强度为91.65,铁皮石斛栽培植株组的平均荧光强度为102.69,实验证明铁皮石斛乙醇提取物诱导MCF-7凋亡与细胞内活性氧水平升高有关。在体内试验中,铁皮石斛试管苗组与铁皮石斛组均能显著提高小鼠的脏器指数(胸腺、脾脏),实验结果如下：铁皮石斛组(胸腺2.664±0.815mg/g、脾脏4.206±0.928mg/g)；铁皮石斛试管苗组(胸腺2.916±0.597mg/g、脾脏3.962±0.417mg/g),表明铁皮石斛乙醇提取物可提高机体免疫力。(4)铁皮石斛GAP建设。从铁皮石斛GAP建设开展和铁皮石斛种植基地的选择进行了探讨研究。本文对铁皮石斛GAP建设的过程所遇到的问题提出看法和建议：①政策上的扶持和认证费用的降低可以有效的开展GAP建设；②企业、种植户与科研单位的良好对接是产量和质量的保证；③产量和质量的平衡在种植阶段需要严格掌控；④生物防治与农药防治相结合,合理的抑制铁皮石斛病虫害。