对氧磷酶(PON)属于芳香酯酶。芳香酯酶的活性与人的多种发病相关,在医学上,是肿瘤、心血管病、肝脏等疾病的病变指标之一,因而探测芳香酯酶的活性并研究PON1底物,对于疾病的早期诊断、及时预警有非常重要的临床意义。吖啶酯是一类较为常见的化学发光试剂,并且可以作为PON1的底物来测定PON1酶的活性,因此本课题合成四种新型吖啶酯,作为底物来考察其发光性能,评价底物的选择性,并用吖啶酯作为底物建立化学发光法,筛选能够激动PON1酶的中药有效成分。通过对9-(4-对氯苯氧羰基)-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐(化合物1)的结构修饰研究,合成了9-(对叔丁基苯氧羰基)-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐(化合物2)、9-苯氧羰基-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐(化合物3)、9-(4-甲基苯氧羰基)-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐(化合物4)、9-(2,4-二甲基苯氧羰基)-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐(化合物5)等四种高量子产率的新型吖啶酯。其中化合物5整个化学发光反应在4s内完成,其他的四种吖啶化合物整个化学发光反应在0.8s内完成;五种吖啶酯化学发光效率大小如下:3>5>4>2>1,苯环上没有取代基的吖啶酯具有更高的化学发光效率,而苯环上的对位被取代的吖啶酯的化学发光效率是有所降低。五种吖啶酯浓度均为4.02×10-11 mol·L-1,缓冲液(Tris-HCl)p H 7.5时22min内表现出了良好的自身稳定性;五种吖啶酯以乙腈作为溶剂,配成浓度为1.25×10-5mol·L-1母液液在4°C的冰箱里保存12周后,它们有不同程度的水解,浓度为1.25×10-5 mol·L-1的一级储备液的稳定性顺序为5>2>4>3>1,其中化合物5自身稳定性最好,而化合物1的自身稳定性最差。以五种吖啶酯作为化学发光底物,考察了rh PON1和人体血清PON1对底物的催化水解曲线,它们的速率常数大小顺序均为1>3>4>2>5,rh PON1和人体血清PON1催化水解吖啶酯的速率常数顺序一致;其中化合物5表现出了最好的稳定性,化合物5酚环上具有两个甲基,增加了化合物的空间位阻,从而增强了化合物的稳定性。以五种吖啶酯作为化学发光底物,考察了酯酶D和脂肪酶对对人体血清PON1催化水解吖啶酯底物的干扰作用,其中酯酶D和脂肪酶的浓度rh PON1浓度大于300倍,从结果可知,rh PON1,脂肪酶和酯酶D催化水解五种吖啶酯的能力相似。这表明,酯酶D和脂肪酶跟rh PON1相比对吖啶酯底物具有较差的催化水解活性。Na+和Ca2+PON1是激动剂,它们提高了底物的特异性和灵敏度。EDTA作为PON1抑制剂来抑制血清中PON1的特异活性,其中化合物5的特异性为最佳。运用以9-4-甲基苯氧羰基-10-甲基吖啶三氟甲基磺酸盐作为底物的化学发光法测定生姜丹参、川芎、三七、人参和川芎六种中药不同溶剂提取物对血清PON1的活性影响。初步结果表明:生姜、人参和三七对血清PON1有激动作用;川芎由于本身具有发光的性质,对测定有较大的干扰,当浓度调到很低时,它对血清PON1没有显示激动作用;虎杖由于自身存在能水解吖啶酯的成分而无法用化学发光法筛选,丹参对血清PON1几乎没有作用。