超声联合正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴介导基因递送的实验研究

来源 :广州医科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:youxiing
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目的:  制备具有声学响应特性的正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴,探索其在超声作用下的基因递送能力  方法:  1、采用酰化反应对低分子壳聚糖进行疏水改性,合成正己酰壳聚糖;通过核磁氢谱法鉴定合成产物;在此基础上,采用单乳化法制备包裹全氟戊烷的正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴,并通过透射电镜表征其形态;采用马尔文粒度仪分析其结合不同比例质粒DNA后的粒径和电位;通过琼脂糖凝胶阻滞实验鉴定其基因结合与保护能力;  2、通过光学显微镜、动态光散射法和体内外超声成像,检测其温度敏感与声学响应能力。分别采用SKOV-3卵巢癌细胞和卵巢癌皮下移植瘤作为模型对象,探索超声联合正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴的基因转染能力。  结果:  核磁氢谱图显示成功合成具有两亲性的正己酰壳聚糖,通过超声乳化成功制备得到正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴;凝胶阻滞实验分析结果显示其具有一定的基因结合与抗核酸酶降解能力;光学显微镜观察、动态光散射法测定和体内外超声成像结果显示,该纳米液滴在超声作用和温度升高的情况下可发生部分相变,形成微纳米气泡。体外细胞转染实验和皮下移植瘤实验结果均显示,正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴具有一定基因递送能力,而超声辐照可增强其基因转染能力。  结论:  成功制备得具有声学响应特性和基因递送功能的正己酰壳聚糖氟碳纳米液滴,该纳米液滴可在超声辐照作用下增强基因转染能力。
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