研究背景:　　 不孕症在所有夫妇中的发病率介于10％～17％。作为解决不孕、不育症行之有效的方法，辅助生育技术(ART)是近几十年来发展起来的具有较大前景的一门新技术，其中最具代表性的是体外受精-胚胎移植(IVF-ET)及单精子卵胞浆内注射(ICSI)。　　 目前已知的影响IVF-ET临床妊娠结局的因素主要包括卵子质量、女方年龄、IVF周期数、移植胚胎数、注射人绒毛膜促性腺激素日(hCG日)血清雌二醇(E2)、孕酮(P)浓度、获卵数及某些不孕病因的影响等。尽管随着ART的发展，临床妊娠率已得到较大提高，但总体而言仍有过半数的周期未获成功，因此影响IVF-ET临床妊娠率的因素仍有待进一步研究。　　 作为辅助生殖技术个中配子之一的卵子，其生长、成熟是受内分泌、自分泌和旁分泌因子调节的复杂过程。卵泡液(FF)含甾体激素和细胞因子等各种因子，提供卵子成熟的微环境，在卵子发育、成熟和排出过程中起重要作用，甚至可能影响以后的受精、早期胚胎发育及植入。尽管每种细胞因子的确切作用尚未完全清楚，大量的证据提示它们的相互作用对卵子发育成熟起重要作用。卵泡液中某些细胞因子可能可以成为IVF-ET临床妊娠结局预测的标志物。　　 既往由于技术所限，无法高通量检测多种细胞因子的水平，现在通过液相芯片技术可能可以达到这样的目的，从而为进一步评价其与妊娠结局的关系提供基础。将液相芯片技术应用于多种细胞因子水平的同时检测，有助于全面判断机体免疫功能、了解分子水平的免疫调节机制。因此，本研究拟利用液相芯片技术检测控制性超促排卵(COH)患者卵泡液中36种不同细胞因子的水平，探讨检测的可行性，并试图寻找与临床妊娠成功有关的细胞因子。　　 研究目的:　　 初步评价液相芯片技术用于检测COH患者取卵时卵泡液中36种细胞因子水平的可行性，比较不同妊娠结局患者行IVF-ET周期中一般情况及卵泡液中各种细胞因子水平的差异，以寻找潜在的与获得临床妊娠有关的细胞因子，为寻找可以预测妊娠与否的标志物打下基础。　　 研究对象与方法:　　 1、选取2008.3-2008.7因各种不孕病因在孙逸仙纪念医院生殖中心接受IVF-ET治疗的患者，共81名，包括输卵管因素59例(单纯输卵管因素34例，单侧或双侧输卵管积液者15例，双侧输卵管切除者10例)，PCOS患者14例，子宫内膜异位症患者8例。　　 2、对象接受病史询问、体格检查及B超检查(经阴道)，取静脉血检测相关激素水平，COH、取卵术及胚胎移植。同时采用液相芯片技术检测患者单一卵泡卵泡液中36种细胞因子水平。　　 3、应用液相芯片技术检测结果初步评价其用于检测卵泡液中36种细胞因子水平的可行性；比较不同妊娠结局患者行IVF-ET周期中一般情况及卵泡液中各种细胞因子水平的差异，寻找潜在的与获得临床妊娠有关的细胞因子。　　 研究结果:　　 1、IL-5、IP-10、Leptin、MIP-1β和VEGF在所有的81个标本中检测到；FGFbasic、GM-CSF、IL-2、IL-4、IL-10、IL-13、IL-17、MCP-3、NGF、PDGF、TNF-β因浓度低于检测低限，在所有的标本中均未测出确切检测结果。BLC、ENA-78、Eotaxin、G-CSF、GRO-α、IFN-γ、IL-1α、IL-1β、IL-1RA、IL-6、IL-7、IL-8、IL12P40、IL12P70、IL-15、IL-17F、MCP-1、MIP-1α、RANTES、TNF-α分别在69.1、35.8、92.6、58.0、85.2、7.4、97.5、1.2、25.9、75.3、13.6、1.2、92.6、23.5、17.3、3.7、91.4、3.7、95.1、1.2％的标本中检测到。　　 2、结合样本细胞因子检测结果范围评价，Eotaxin、GM-CSF、IL-10、IL12P40、IL12P70、IL-17F、IL-1α、IL-1β、IL-2、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IP-10、Leptin、MCP-3、MIP-1β、NGF、TNF-α、TNF-β、VEGF的各标准点的偏倚度(DEV)及平均DEV均在允许范围内，可认为标准曲线的拟合程度较好，检测的准确度较高。　　 3、IL-10、IL-1β、IL-4、IL-5、IL-6、Leptin、MIP-1β、TNF--β、VEGF标准点检测的变异系数在允许范围内，可以认为上述各细胞因子测量的可重复性较好；而ENA78、Eotaxin、IL12P40、IL-15、IL-1RA、IL-2、IL-7、IP-10、NGF、PDGF-BB、TNF-α则存在1个或以上的标准点检测值变异系数大于15％；BLC、FGFbasic、G-CSF、GM-CSF、GRO-α、IFN-γ、IL12P70、IL-13、IL-17、IL-17F、IL-1α、IL-8、MCP-1、MCP-3、MIP-1α、RANTES则在取值的低限范围内出现明显突出值，无法计算低限标准样品的变异系数。　　 4、对12个样本的卵泡液标本进行双份检测，计算测量结果变异系数(CV)、均数及差异标准差，Eotaxin、GRO-α、IL-1α、IL-5、IP-10、MCP-1、MIP-1α、MIP-1β、RANTES、VEGF的平均变异系数在允许范围，提示检测的可重复性较好，精密度较高。BLC、ENA78、G-CSF、IL12P40、IL-1RA、IL-6、IL-7的检测结果平均变异系数超出允许范围。　　 5、未临床妊娠组及临床妊娠组间在基础LH、hCG日P的差异有统计学意义，提示较未临床妊娠组，临床妊娠组基础LH及hCG日P较低，余各临床资料及卵泡液中细胞因子水平(IL-5、Leptin、MIP-1β、VEGF)的差异无统计学意义。　　 结论:　　 1、液相芯片技术可用于检测卵泡液中细胞因子水平，但仍须进一步完善检测系统的评价及提高检验灵敏度，使可检测的卵泡液中目的细胞因子范围扩大。　　 2、基于检测系统的评价及灵敏度的限制，研究结果初步提示卵泡液中IL-5、Leptin、MIP-1β、VEGF水平与IVF-ET临床妊娠的结局无关。