目的：　　呼吸机相关性肺炎（Ventilator-associated pneumonia,VAP）是导致新生儿死亡的主要疾病之一，其主要原因是气管导管生物被膜（Biofilms，BF）形成，影响抗生素的杀菌能力。脐带间充质干细胞（human umbilical cord mesenchymal stem cells，hUCMSCs）具有分泌抗菌肽的功能，将为临床治疗VAP提供了应用前景。本研究将hUCMSCs与铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa，PA)共培育，探讨hUCMSCs浓度对分泌抗菌肽水平的影响，及其对气管导管表面BF形成以及基因表达的影响。　　对象与方法：　　1、为探讨hUCMSCs浓度对分泌抗菌肽水平的影响，配制8组浓度梯度的hUCMSCs细胞悬液（分别为1×104/ml，5×104/ml，1×105/ml，5×105/ml，1×106/ml，5×106/ml，1×107/ml，5×107/ml），分别与3×104CFU/ml的PA菌悬液共培育6小时，高速离心、过滤细胞成分，收集上清液。统计分析hUCMSCs浓度与抗菌肽（LL-37和HBD-2）的浓度的关系。　　2、为探讨PA浓度对hUCMSCs分泌抗菌肽水平的影响，配制7组浓度梯度的PA菌悬液（5×102CFU/ml，5×103CFU/ml，5×104CFU/ml，5×105CFU/ml，5×106CFU/ml，5×107CFU/ml，5×108CFU/ml），分别与1×106/ml的hUCMSCs细胞悬液共培育6小时，高速离心、过滤细胞成分，收集上清液。　　3、根据试验1、2的结果，确定hUCMSCs与PA共培育的最佳浓度，将PA菌株配制成菌悬液，实验组PA与hUCMSCs共培育，空白组PA与细胞培养基共培育，6小时后离心并滤取上清液。将实验组与空白组上清液分别与BF气管导管体外模型共培育，7天后结晶紫染色定量分析两组气管导管表面BF形成量的差异，分析两组细菌泳动能力的差异，电子显微镜分析BF形态差异，基因芯片分析BF相关基因的表达差异。　　结果：　　1、当PA浓度固定为5×106CFU/ml时，抗菌肽水平随着hUCMSCs细胞浓度升高而升高，当hUCMSCs浓度为5×106/ml时，抗菌肽浓度最高（LL-37为7.96±0.15ng/ml，HBD-2为1.83±0.17pg/ml）。当hUCMSCs浓度固定为1×106/ml时，抗菌肽水平随着PA浓度升高而升高，当PA浓度达5×106CFU/ml时，抗菌肽浓度最高（LL-37为7.00±0.11ng/ml，HBD-2为1.96±0.13pg/ml）；当PA浓度大于5×106CFU/ml时，上清液抗菌肽水平与PA的浓度呈负相关。　　2、hUCMSCs受到PA的刺激后，能分泌抗菌肽至上清液中，实验组上清液中LL-37与HBD-2浓度分别为6.89±0.41 ng/ml与1.89±0.53ng/ml，空白组上清液中LL-37与HBD-2浓度分别为3.59±0.44ng/ml与0.67±0.54ng/ml，两组上清液比较，其中LL-37与HBD-2浓度差异均有统计学差异（P＜0.05）。　　在BF定量分析实验中，实验组OD595值为0.303±0.066，空白组OD595值为0.435±0.125，两组比较差异有统计学差异（P＜0.05），实验组较空白组减少约30％的BF形成量。　　在PA附着实验中，实验组OD595值为0.353±0.018，空白组OD595值为0.495±0.023，实验组PA附着较空白组减少，两组比较差异有统计学差异（P＜0.05）。　　结论：　　1.当PA浓度固定时，抗菌肽水平随着hUCMSCs细胞浓度升高而升高。当hUCMSCs浓度固定时，抗菌肽水平随PA浓度升高而升高。　　2.经过PA的感染刺激后，hUCMSCs能分泌抗菌肽LL-37与HBD-2，并明显抑制气管导管表面BF的形成。