新疆边境地区蜱种、蜱传立克次体分布规律及分子特征研究

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背景:新疆位于中国西北边陲,陆地边境线5600多公里,约占全国陆地边境线的四分之一,周边与蒙古国等八国相邻。新疆在历史上是古丝绸之路的重要通道,是我国倡导的“一带一路”北线通往中亚乃至欧洲的重要陆地门户纽带。而蜱传立克次体可通过国际间家畜交易、候鸟及野生动物迁徙而散播,造成人畜立克次体病的感染。本研究旨在对新疆边境线地区蜱类进行蜱种的鉴定以及分析蜱传立克次体的分布规律和分子特征进行探究,为我国蜱传病原“外来入侵”监测及国际间疫病“联防联控”提供科学依据。方法:(1)2014年3月-2016年6月采集新疆边境地区14个县市家畜体表寄生蜱,对采集到的蜱进行形态学鉴定以及线粒体16S rRNA、COI、12S rRNA基因分子生物学鉴定,并进行系统发育分析。(2)采用多位点序列分型(Multilocus sequence typing,MLST)方法对新疆边境地区采集的蜱分别进行17kDa蛋白抗原(17kDa),外膜蛋白A、B(ompA、ompB),柠檬酸合成酶基因(gltA),细胞表面抗原1、4基因(sca1、sca4)以及16S rRNA原核基因(rrs)共7个基因8个片段的聚合酶链式反应(PCR)检测立克次体核酸。对立克次体阳性样本进行测序和序列分析,并对阳性结果进行统计学分析。建立多基因系统进化树确定其遗传关系。结果:(1)新疆边境地区14个县市共采集到1279只寄生蜱。经蜱的形态学和分子生物学鉴定,本研究寄生蜱隶属三属五种,分别为:血蜱属Haemaphysalis(2种):刻点血蜱(H.punctata),短垫血蜱(H.erinacei)。革蜱属Dermacentor(2种):草原革蜱(D.nuttalli),边缘革蜱(D.marginatus)。扇头蜱属Rhipicephalus(1种):图兰扇头蜱(R.turanicus)。(2)新疆边境地区14个县市采集的1279只蜱中共检出立克次体528份,平均感染率为41.28%。(3)边疆地区蜱中存在饶氏立克次体(Rickettsia raoultii)、马赛立克次体(R.massiliae)、埃氏立克次体(R.aeschlimannii)、斯洛伐克立克次体(R.slovaca)、西伯利亚立克次体(R.sibirica)、康氏立克次体印度亚种(R.conorii subsp.indica)和暂定巴布瑞立克次体(Candidatus R.barbariae)共7种立克次体感染,各边境县市立克次体携带率在6.25-77.92%之间,各蜱种立克次体携带率为6.25-46.10%。结论:(1)图兰扇头蜱是新疆边境地区优势蜱种,遍布几乎整个南边境线以及部分北边境地区;短垫血蜱为稀缺蜱种,仅分布在中-哈边境。(2)新疆边境地区呈现蜱内斑点热群立克次体高携带率,且南边境线阳性率显著高于北边境线地区。(3)首次在稀有野生动物虎鼬体表的短垫血蜱内检测到饶氏立克次体核酸。(4)首次在新疆边境地区检测到4种中国新的立克次体核酸,分别为埃氏立克次体(R.aeschlimannii)、马赛立克次体(R.massiliae)、康氏立克次体印度亚种(R.conorii subsp.indica)和暂定巴布瑞立克次体(Candidatus R.barbariae),将中国蜱传立克次体种类从六种扩大到了十种。(5)发现西伯利亚立克次体以及埃氏立克次体变异株,暂分别命名为西伯利亚新疆株(R.sibirica strain Xinjiang)和埃氏立克次体中国株(R.aeschlimannii strain China)。(6)本调查贯穿了新疆由北至南整条边境线,覆盖了新疆几乎所有边境县市,既为我国内陆地区疫病预警体系的提供了科学构架,又为国际间数据共享提供了基本信息,更为预防和控制生物恐怖引起的各种疾病及其对社会的影响提供了帮助。未来应对中-亚、中-欧边境地区国际贸易(特别是畜种引进、皮张等畜产品引进)、候鸟及野生动物蜱传立克次体进行定期监测与边境虫媒病预警体系的建立与完善。
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