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第一部分：滑膜成纤维细胞的分离培养目的：采集OA滑膜组织及正常滑膜组织,建立滑膜成纤维细胞体外培养体系。方法：采集OA患者滑膜及正常滑膜组织,采用混合酶消法获取原代滑膜细胞进行体外培养,使用流式细胞术检测细胞表面CD3+、CD14+及CD90+的表达, MTT法测定两种滑膜细胞生长曲线。结果：流式细胞仪检测细胞表面表达为CD3+为2.53%,CD14+为3.75%,CD90+为96.11%,符合滑膜成纤维细胞特征。正常滑膜与OA滑膜增殖速度无差异。结论：采用混合酶消法可成功培养滑膜成纤维细胞,三代细胞纯度在96%以上。正常滑膜与OA滑膜增殖速度无差异。第二部分四种药物对OA滑膜细胞分泌IL-1β、MMP-13、PGE2的影响目的：探索各种药物对滑膜细胞的具体影响,不同药物共同作用能否取得更好疗效,指导临床药物应用。同时对于塞来昔布关节腔内注射给药的可行性进行分析。方法：采用地塞米松、塞来昔布、大黄酸及玻璃酸钠四种药物干预滑膜成纤维细胞24h,MTT法测定细胞的存活分数。采用双抗夹心ELISA法测定不同药物干预24h后细胞培养上清液中IL-1β、 MMP-13、PGE2的浓度。结果：OA滑膜体外培养时三项指标均较正常滑膜表达水平高；四种药物对滑膜细胞增殖无影响；大黄酸可降低IL-1β、MMP-13的水平,不能降低PGE2的水平；塞来昔布可降低滑膜细胞IL-1β、PGE2的分泌,但会导致MMP-13分泌水平升高；地塞米松可降低IL-1β、 PGE2、MMP-13的水平；大黄酸与地塞米松在降低IL-1水平上有协同作用。结论：1.OA过程中存在滑膜炎性病变。2.双醋瑞因的活性代谢产物大黄酸能够降低IL-1β、MMP-13水平,但不能降低PEG2水平。3.塞来昔布能够降低IL-1β、PGE2水平,但可导致MMP-13水平升高。4.地塞米松可以显著降低IL-1β、MMP-13及PGE2水平。地塞米松与大黄酸可协同降低IL-1p。5.塞来昔布与大黄酸联合应用可以有效降低IL-1β、MMP-13及PGE2水平。第三部分四种药物对于LPS干预后OA滑膜细胞分泌IL-1β、 MMP-13、PGE2的影响目的：采用细菌脂多糖(LPS)诱导体外培养滑膜细胞的炎性反应,建立OA滑膜炎模型,探讨地塞米松、塞来昔布、大黄酸及玻璃酸钠对于滑膜炎症的具体作用,不同药物联合使用是否可取得更好的疗效。同时对于塞来昔布关节腔内注射给药的可行性进行分析。方法：使用LPS10mg/L及四种药物共同干预体外培养的OA滑膜细胞,MTT法测定LPS及各药物干预24h后OA滑膜细胞的存活分数SF值,双抗夹心ELISA法测定细胞培养上清液中IL-1β、 MMP-13、PGE2的含量。结果：OA滑膜对照组与LPS及药物干预后滑膜细胞组之间SF值无统计学差异；LPS干预后正常细胞及滑膜细胞培养上清液中IL-1β、MMP-13、PGE2的水平明显升高；大黄酸可以明显降低LPS诱导的OA滑膜细胞培养上清液中IL-1β、MMP-13水平,但对于PGE2水平无作用；塞来昔布可明显降低IL-1β、PGE2水平,但会升高MMP-13水平。地塞米松可显著降低IL-1β、 MMP-13、PGE2的水平；玻璃酸钠可以降低LPS诱导的OA滑膜细胞培养上清液中IL-1β、 MMP-13、PGE2的浓度。玻璃酸钠与塞来昔布共同作用较塞来昔布单独作用其上清液中MMP-13的水平下降。结论：1.细菌脂多糖可诱导滑膜细胞的炎性反应。2.玻璃酸钠能够减低LPS的促炎性作用。3.双醋瑞因的活性代谢产物大黄酸能够降低IL-1β、MMP-13水平,但不能降低PEG2水平。4.塞来昔布能够降低IL-1β、PGE2水平,但可导致MMP-13水平升高。5.地塞米松可以显著降低IL-1β、MMP-13及PGE2水平。地塞米松与大黄酸可协同降低IL-1p。6.塞来昔布与大黄酸联合应用可以有效降低IL-1β、MMP-13及PGE2水平。