【摘 要】
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磷脂酶D (phospholipase D,PLD)通过水解磷脂而产生信号分子磷脂酸(phosphatidic acid,PA),且导致生物膜组分的重组。拟南芥的研究表明磷脂酶D参与植物多种逆境条件下的脂质
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磷脂酶D (phospholipase D,PLD)通过水解磷脂而产生信号分子磷脂酸(phosphatidic acid,PA),且导致生物膜组分的重组。拟南芥的研究表明磷脂酶D参与植物多种逆境条件下的脂质代谢和信号转导过程,具有显著的生物学效应。水稻含有17个PLD基因,其生物学功能有待探索。本研究通过PCR技术分离获得了磷脂酶D家族基因一批纯合突变体包括PLDα1、PLDα2、PLDα3、PLDα6、PLDβ1、 PLDβ2、PLDδ2、PLDζ1和PLDζ2,其中PLDδ2突变体因T-DNA插入启动子区域导致其表达量上调,而PLDζ和PLDβ2以及PLDα1纯合突变体中相应基因的表达被完全抑制。这些纯合突变体为分析水稻PLD家族的基因功能奠定了基础。同时本研究分析了PLD家族基因在盐胁迫条件下的表达量,结果发现多数PLDs包括PLDα1、PLDα3、PLD δ2、PLDζ1、PLDζ2、PLDφ及PLDβ2被盐胁迫所诱导,暗示PLD在盐胁迫反应中的作用。利用相关PLD突变体分析PLD在生长和盐胁迫反应中的作用,结果发现在正常生长条件下,PLDβ2的缺失导致株高变矮,其株高仅为野生型的70%,且粒型显著变短;在盐胁迫下PLDβ2缺失突变体的生长受阻程度更大,其分蘖率、抽穗率和致死率显著低于对照野生型,初步表明水稻PLDβ2在植株生长和盐胁迫响应中具有正调控作用。此外,本研究还克隆和表达了PLDδ2蛋白,得到了预期大小的蛋白,为后续研究积累了材料。
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