为了构建局部免疫耐受的同种异体组织工程化软骨，延长其在体内存活时间．我们首先应用RT-PCR和TA克隆技术从激活的小鼠脾脏淋巴细胞总RNA中扩增mFasL cDNA并克隆到T载体，并经测序确证。为了探讨逆转录病毒载体系统转染同种异体软骨细胞的最佳条件，本研究利用增强型绿色荧光蛋白EGFP）具有表达荧光特异性高、易于检测等独特的优势，构建能稳定表达EGFP的重组逆转录病毒载体EGFP－PLNCX2，转染同种异体软骨细胞，荧光显微镜观察转染的效果，流式细胞仪测定转染的效率。为了观察逆转录病毒载体系统介导体软骨细胞后是否影响软骨的构建，利用以上EGFP重组逆转录病毒载体转染的的软骨细胞和组织工程材料 pluronic-27复合物构建兔同种异体组织工程软骨 ，荧光显微镜和激光共聚焦显微镜观察其构建过程和逆转录病毒载体系统介导基因的体内表达格局；在掌握逆转录病毒载体系统介导基因的体外和体内规律后，构建目的基因FasL（CD178）的逆转录病毒载体系统，RT-PCR、免疫印迹、免疫组织化学、流式细胞仪和生物学活性等多种水平证实mFasL（CD178）蛋白在该系统的表达，最后利用FasL（CD178）重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞和组织工程材料 pluronic F-127复合物构建兔同种异体组织工程软骨，与未转染者比较其在体内的转归。结果显示：重组逆转录病毒载体EGFP-PLNCX2能有效地转染软骨细胞。重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞能形成组织工程软骨，增强型绿色荧光蛋白（EGFP）是组织工程化软骨形成过程的良好示踪剂，且不影响组织的形成．克隆到的mFasL基因测序确证，序列与基因库中一致，并能通过逆转录病毒PLNCX2表达系统有效的表达，并具有显著抑制同种异体单向混合淋巴细胞反应的功能。FasL基因重组逆转录病毒载体转染的软骨细胞能形成组织工程软骨，且能延迟退变。这些结果表明，转染FasL的软骨细胞能有效地诱导淋巴细胞凋亡，从而延缓同种异体排斥。