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目的:观察补胞汤对胚泡着床障碍小鼠子宫内膜胞饮突及ER、PR表达的影响,探讨其对子宫内膜容受性的影响,为治疗不孕症提供实验依据。
方法:选用SPF级妊娠ICR(Institute of Cancer Researcch)小鼠,随机分为假模型组、模型组和中药组,采用注射米非司酮建立胚泡着床障碍小鼠模型。从Pd1(妊娠第1日)至Pd7,中药组每日给予补胞汤中药灌胃,假模型组和模型组则给予等量生理盐水灌胃。Pd4上午7~8时,模型组和中药组皮下注射米非司酮注射液,制成胚泡着床障碍模型;假模型组注射等量丙二醇。Pd5上午9:30~10:00每组各取6只小鼠,处死取全子宫,将一侧宫角固定做石蜡切片,一部分行HE染色光镜观察子宫内膜的组织学变化,另一部分行免疫组化法(IHC)检测子宫内膜ER、PR的表达,染色过程采用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结(SP)法;另一侧宫角固定后扫描电镜观察各组子宫内膜胞饮突发育情况。Pd7各组取20只小鼠观察妊娠数和计数双角子宫的着床胚泡数。实验数据用SPSS17.0软件行统计学处理。
结果:1.组织学变化:假模型组基质细胞增生,腔上皮下基质细胞呈蜕膜化,间质内血管丰富;模型组可见腺体呈假复层柱状上皮,间质中成纤维样细胞均匀分布,有大量巨噬细胞浸润;中药组间质中基质细胞增生密集,间质中血管丰富,呈蜕膜样变。2.ER、PR的表达:模型组子宫内膜ER、PR表达水平均低于假模型组(P<0.05);中药组子宫内膜ER、PR表达水平均高于模型组(P<0.05),并且与假模型组无显著性差异(P>0.05)。3.胞饮突发育情况:模型组子宫内膜表面未见明显的胞饮突发育,表现为增生早期的子宫内膜变化,中药组可见相对完全发育的胞饮突,发育形态明显超前于模型组,接近假模型组。4.妊娠率和着床胚泡数:模型组妊娠率比假模型组显著降低(P<0.05),平均着床胚泡数亦显著低于假模型组(P<0.001);中药组的妊娠率与模型组比较,中药组的妊娠率及平均着床胚泡数均比模型组显著增加(P<0.05,P<0.01),但平均着床胚泡数仍低于假模型组(P<0.05)。
结论:补胞汤对胚泡着床障碍小鼠的子宫内膜容受性有确切的促进作用,其作用机制是通过提高子宫内膜表面ER、PR的表达水平和促进子宫内膜表面胞饮突的发育,进而提高胚泡着床率。