氟对C57BL/6J小鼠睾丸间质细胞的影响

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目的:探讨不同剂量氟作用于雄性小鼠后对骨钙素及生殖功能的影响。  方法:3~4周龄SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠48只,体重20±2g,分笼饲养,每笼6只。用0mg/L(对照组)、50mg/L(低剂量组)、100mg/L(中剂量组)、150mg/L(高剂量组)NaF干预,每周检测体重变化。12W后酶联免疫吸附实验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血液中骨钙素(Bone Glaprotein,BGP)、睾酮(Testosterone,T)、促黄体生成素(Luteinizing Hormone,LH)、卵泡刺激素(Follicle-stimulating Hormone,FSH)含量。电子称对脏器进行称重。电极法检测各脏器的含氟量。苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin staining,HE)染色和透射电镜观察睾丸形态学变化,免疫荧光法检测睾丸G蛋白耦联受体C家族6组成员A(G protein coupled receptor family C,Group6,subtype A,GPRC6A)的表达。  结果:染氟中、高剂量组BGP水平较对照组增高(P<0.05),其T、LH水平较对照组降低(P<0.05)。染氟高剂量组FSH水平较对照组降低(P<0.05)。低剂量组脾脏、附睾、睾丸的脏器系数较对照组明显增加(P<0.05),中剂量组精囊腺的脏器系数较对照组降低(P<0.05),高剂量组胰的脏器系数较对照组明显增加(P<0.05),而脾脏、睾丸、精囊腺的脏器系数较对照组明显降低(P<0.05)。中、高剂量组小鼠的睾丸间质细胞的数量较对照组明显减少(P<0.05)。股骨、椎骨的氟负荷量较对照组明显增高(P<0.05),睾丸、附睾、精囊腺氟负荷量较对照组无统计学差异。形态学观察显示:低剂量组小鼠睾丸生精细胞数量减少,中、高剂量组小鼠睾丸生精细胞排列紊乱、各级生精细胞数量明显减少。染氟组小鼠睾丸间质细胞中GPRC6A的表达呈阳性。  结论:氟作用于骨,骨钙素分泌旺盛,通过与GPRC6A结合导致睾丸间质细胞形态学发生改变,数量减少、睾酮等相关激素合成减少,同时氟作用于睾丸,使睾丸脏器系数降低,对小鼠生殖能力造成影响,导致生殖功能下降。
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