藏药矮兔耳草提取物抑菌、抗肿瘤、对肝损伤保护作用的研究

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矮兔耳草(Lagotis humilis Tsoong et H.P.Yang)是我国西北地区分布很广的一种多年生肉质草本,是一种极为宝贵的药用植物资源。为了开发矮兔耳草的药用价值,研究了矮兔耳草全草提取物抑菌抗肿瘤活性及其对CCl4诱发的小鼠肝损伤的保护作用,为这一植物资源的开发提供实验研究依据。本文用有机溶剂法提取提取物;用抑菌圈法进行体外抑菌活性研究;用MTT比色法检测提取物对MGC-803胃癌细胞株增殖的抑制作用;用倒置相差显微镜观察细胞的形态学变化;采用琼脂糖凝胶电泳法检测细胞凋亡过程中DNA碎片的形成;用流式细胞仪分析并测定细胞凋亡率;每组小鼠腹腔注射给药一次,连续7d记录死亡动物数,计算半数致死量;建立CCl4诱发的小鼠肝损伤模型,观察提取物对肝脏的保护作用。研究发现矮兔耳草提取物能抑制金黄色葡萄球菌ATCC25923、大肠埃希菌ATCC25922、枯草杆菌、耐药表皮葡萄球菌、白色念珠球菌、粪肠球菌的生长繁殖,形成抑菌圈;浓度越大抑菌圈直径越大,但对铜绿假单胞菌、腊状芽孢杆菌没有抑制作用。矮兔耳草提取物在4.0~12.0mg·ml-1范围内均对MGC-803胃癌细胞株增殖有抑制作用,且抑制作用随药物浓度的增加和作用时间的延长而增强。矮兔耳草提取物在4.0~12.0mg·ml-1浓度时与MGC-803胃癌细胞株共培养24h后,观察到细胞凋亡形态学特征,流式细胞仪通过对单个细胞形状的快速测定,在DNA染色后,形成一个DNA含量<2n(即<G1期细胞)的分布区,即“亚G1峰”。培养48h后,DNA凝胶电泳呈现梯形条带。小鼠灌胃给药后连续观察7d,SPSS软件处理,矮兔耳草提取物的LD50=916.22mg·kg-1。矮兔耳草提取物实验组的转氨酶含量较CCl4模型组少,说明矮兔耳草提取物能减轻CCl4诱发的小鼠肝损伤。
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