本试验的主要目的是研究冻融与获能处理过程中,猪精子前顶体蛋白被活化成顶体蛋白的差异。分别将精子在4℃下平衡20min、40min、60min、100min,筛选最适合猪精液的冷冻平衡时间；向精子分别添加2%、4%、6%、8%浓度的甘油,筛选最适合猪精子的甘油浓度；向精子分别用咖啡因与维生素E,筛选出更适合猪精子的冷冻保护剂。从而近一步优化猪精子的冻融过程。利用SDS-PAGE和Western Blotting的方法,分析冻融和获能处理中猪精子前顶体蛋白的转化过程。结果表明:1、精子在4℃下平衡时,以60min冷却平衡的猪精子质量明显高于以20min,40min、80min、100min(P<0.05),精子质量在此时产生峰值,精子活率达到33.75%：顶体完整率达到34.25%；低渗膨胀率达到31.50%。而且,处理组精子质量都明显高于对照组,因此可以看出4℃条件下平衡在精子冷冻过程中的重要性。.以2%和4%甘油浓度对精子预处理组,冻融后猪精子的质量明显高于对照组和其它浓度组(P<0.05),其活率分别为36.2%和35.5%；顶体完整率分别为35.4%和35.2%;低渗膨胀率分别为33.8%和34.2%。可见浓度为2%和4%的甘油在冻融过程中可以更有效地保护精子,使精子质量更高,从而提高冻融精子的实际利’用价值。2、分别将以5mg/mL咖啡因和200mg/ml维生素E作为冷冻保护剂的冻融精子和新鲜精子进行SDS-PAGE分析比较。添加咖啡因和维生素E作为冷冻保护剂的冻融精子相对于无咖啡因的冻融精子样本条带少,因此与新鲜精子更相似。这样的结果说明,咖啡因和维生素E都能阻止个别蛋白提前转化,但经过对比咖啡因效果更明显。3、在冻融过程中,猪精子部分前顶体蛋白受到刺激从而被破坏,并向获能样方向转化,部分43KDa的前顶体蛋白被激活,转化成35KDa和28KDa的α-顶体蛋白和β-顶体蛋白。