趋化因子CCL17在绒毛滋养细胞的表达及对外周血CCR4+T细胞的趋化作用

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研究目的探讨趋化因子CCL17在绒毛滋养细胞中的表达及在母胎免疫中的调节作用。研究方法 收集2015年6月至2015年8月在广西医科大学第一附属医院自愿要求行人工流产术的正常妊娠妇女5例,收集绒毛组织,免疫组织化学法定位检测趋化因子CCL17的表达情况。抽取正常育龄期妇女外周血,分离外周血单个核细胞(PBMC),使用Ong/mL(对照组)、10ng/mL、 100ng/mL浓度的重组人CCL17对正常妇女外周血单个核细胞(PBMC)进行4次趋化实验,每次设双副孔。收集下室细胞行流式细胞术,对比三组趋化后CD4+CCR4+T细胞、CD4+CCR4+CD25-T细胞、CD4+CCR4+CD25+T细胞、CD4+CD25+CD127LOW/- T细胞、CD4+CD25+CD127LOW/-中CCR4+T细胞的数目以及CCR4的表达率。研究结果1.免疫组织化学结果:早孕绒毛滋养细胞表达CCL17。2.0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重组CCL17组迁移到Transwell小室下室内CD4+CCR4+T细胞的细胞分别是639±380个、1188+440个、1298±396个,10ng/mL组与对照组间无差别(P>0.05),100ng/mL组的细胞较对照组增多(P<0.05)。3.0ng/mL、10ng/mL、100g/mL组迁移到下室的CD4+CCR4+CD25-T细胞数分别是423+250个、618+196个、701+260个,三组间无差别(P>0.05)。4.0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL组迁移到Transwell小室下室内CD4+CCR4+CD25+T细胞的细胞数分别是212±129个、564±270个、593±143个,与对照组相比,10ng/mL组与100ng/mL组细胞数均明显增多(P<0.05),但10ng/mL、100ng/mL组之间无差别(P>0.05)。5.0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重组CCL17组中到达Transwell小室下室内CD4+CD25+CD127LOW/-T细胞数分别是97±50个、355±148个、442±38个,与对照组相比,10ng/mL、100ng/mL组均明显增多(P<0.05),但10ng/mL与100ng/mL组间比较无差别(P>0.05)。6.0ng/mL、10Ong/mL、100ng/mL的重组CCL17组中到达Transwell小室下室内CCR4+的CD4+CD25+CD127LOW/- T细胞数分别是71±38个、277±124个、333±52个,与对照组相比,10ng/mL、100ng/mL组均明显增多(P<0.05),但10ng/mL、100ng/mL之间无差别(P>0.05)。7.CD4+CD25+CD127LOW/-T细胞上CCR4的表达率均高达70%以上。Ong/mL、10ng/mL、100ng/mL组表达率分别为72.7±4.8%,、76.9±4.7%、74.9±6.6%,三组间无差别(P>0.05)。研究结论1.早孕绒毛滋养细胞表达CCL17。2.CCL17不能募集CD4+CCR4+CD25-T细胞,CCL17可能对Th17、Th22、Th9细胞没有趋化作用。3.CCL17可募集CD4+CCR4+CD25+T细胞o4.Treg细胞高表达CCR4,母胎界面的绒毛滋养细胞可能通过产生CCL17对外周Treg细胞产生募集作用以介导母胎免疫耐受。
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