亲和沉淀技术作为目前最具有应用前景的分离纯化技术，成为当前生化产品分离纯化领域研究的热点，而这项技术的关键就是合成可逆溶解的、可反复回收利用的聚合物。本研究课题合成了N-羟甲基丙烯酰胺(NHMA)单体，并与甲基丙烯酸(MAA)、甲基丙烯酸甲酯(MMA)、甲基丙烯酸二甲氨基乙酯(DMAEMA)三种丙烯酸类单体通过溶液聚合法，以偶氮二异丁腈为引发剂进行自由基无规聚合反应得到新型pH敏感的水溶解可逆两性聚合物PMMDN，实验测定了该聚合物的等电点及其在等电点下的回收率，重复循环使用聚合物进行回收实验五次，回收率均保持在96％-98％范围内。用乌式粘度计测定了该聚合物的粘均分子量，并用红外光谱和核磁共振表征了该聚合物的波谱性质。经测定，此聚合物中MAA，MMA，DMAEMA，NHMA四种单体的摩尔比为：9.3：5.1：3.9:1，粘均分子量为6.97×104，等电点为6.50±0.02。 将该聚合物PMMDN借用层析介质活化的方法——环氧氯丙烷活化，将聚合物上的羟基活化为环氧基，活化后的聚合物连接特异性亲和配基对氨基苯甲脒，并将此亲和沉淀剂应用于从粗胰酶中纯化胰蛋白酶。实验表明，该亲和沉淀剂对胰蛋白酶有特异性吸附，最佳吸附条件为20℃、pH7.5、初始酶浓度2.0mg/ml，吸附时间120min。当配基密度为39.5μmol/g时，吸附容量可达113.2mg/g聚合物。结合了胰蛋白酶的亲和沉淀剂容易洗脱，以0.1mol/L甲酸+0.5mol/LNaCl，pH2.5混合液作为洗脱剂，洗脱率高达93.7％，经洗脱得到含胰蛋白酶的上清液，对粗胰酶的纯化倍数为6.13倍，纯化后胰蛋白酶的比活达到1637.13U/mg，表明此亲和沉淀剂对胰蛋白酶有明显的纯化效果。 经实验表明，本文合成的亲和沉淀剂可用于粗胰酶中胰蛋白酶的纯化，且在等电点可以反复回收利用，在生物分离领域有较好的应用前景。