植物RTH的进化和功能研究及新的乙烯信号组分的鉴定

来源 :中国科学院研究生院 中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuang25748
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本研究分为二部分:   第一部分、植物RTH的进化和功能研究   拟南芥RTE1是一个定位于高尔基体通过乙烯受体ETRl的氨基端调节乙烯信号的蛋白。我们的系统发生分析表明RTH(RTE1的同源基因)的特异性复制在种子植物中广泛存在,最古老的复制发生在被子植物的共同祖先基因。水稻的OsRTH1可以互补拟南芥rte1-2功能缺失突变,并且过表达OsRTH1产生的乙烯不敏感性依赖于拟南芥的ETR1。其它RTHs不能互补rte1-2功能缺失突变,也不影响乙烯信号。GFP-OsRTHs融合蛋白定位于高尔基体,而其它GFP-RTHs定位于内质网和细胞核。我们推测原始的RTHs可能没有乙烯信号转导的作用,在基因复制和突变后,RTE1和OsRTH1定位到高尔基体上才获得了乙烯信号转导的功能。经过叶片老化实验,乙烯诱导的基因表达分析和乙烯处理对水稻幼苗生长的促进作用等分析,表明OsRTH1过表达水稻对乙烯反应不敏感。利用这一不敏感水稻材料和野生型水稻在1-MCP,生长素,赤霉素和乙烯等处理条件下水稻幼苗的表型分析,显示乙烯和生长素对水稻根部的发育以及乙烯和赤霉素对水稻茎部的生长发育均有不同的作用。   第二部分、新的乙烯信号组分的鉴定   白化苗的三重反应现象常被用于在拟南芥中筛选乙烯反应突变体。但是这一方法筛选得到的突变体已近趋于饱和,很难再用三重反应现象来筛选到新的乙烯信号途径突变体。本研究中,我们用一种新的方法:筛选一个弱的ctr1突变体的增强子,获得了新的乙烯信号途径组分突变体ecr1(Enhancer of CTR1)。ecr1突变加重了ctr1的组成型乙烯反应表型,ecr1 ctr1双突变体表现强烈的组成型乙烯反应。通过图位克隆的方法,我们鉴定了ECR1,它是一个功能未知的基因。在ecr1 ctr1中过表达ECR1的DNA或cDNA均可以回复其强烈的组成型乙烯反应表型。遗传分析和银离子处理结果表明ECR1作用于受体下游,EIN3上游,负调乙烯反应。ECRl是否对CTR1有专一性作用,及其在乙烯信号转导途径中的具体位置和作用机理在进一步研究之中。
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