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目的:研究哈尔滨医科大学附属第二医院临床分离亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌耐药性、D类碳青霉烯酶、整合酶及ISAbal流行情况,阐明我院鲍曼不动杆菌分子流行病学特征及其主要耐药机制,为有效控制院内感染发生、耐药基因的传播以及为临床合理应用抗生素提供依据。 方法:收集哈尔滨医科大学附属第二医院2011年10月-2012年6月自临床分离的非重复鲍曼不动杆菌140株,多重PCR方法鉴定鲍曼不动杆菌ITS基因型;采用K-B纸片法检测鲍曼不动杆菌对临床常用14种抗生素的敏感性和耐药性;x2检验分析亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌和亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌对各种抗生素的耐药性差异;改良Hodge实验对产碳青霉烯酶菌株初筛;多重PCR检测D类碳青霉烯酶及整合酶基因(Int1、Int2),PCR方法分别检测blaOXA-23-like和blaOXA-5like1上游ISAba1存在情况;对部分blaOXA-23-like、blaOXA-21-like、blaOXA-51-like阳性菌株采用全编码基因扩增后测序;再与NCBI在线数据库进行Blast比对分析后确定基因型。 结果:(1)多重PCR鉴定结果137株基因型是鲍曼不动杆菌。(2)药敏实验结果124株为亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌,13株为亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌;亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌仅对头孢哌酮-舒巴坦SCF表现出相对较低的耐药率(58.87%),对其余除阿米卡星AK之外的12种抗生素耐药率均>90%;经统计学分析亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌与亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌对各种抗生素耐药率存在明显差异(P<0.05),具有统计学意义。(3)137株鲍曼不动杆菌主要分布于ICU病房(38.68%,53/137)和神经外科(23.36%,32/137),标本类型主要为痰液(83.94%,115/137)。(4)137株鲍曼不动杆菌中,改良Hodges实验阳性85株(62.04%,85/137)。(5)blaOOXA-51-like阳性130株(94.89%,130/137),有7株亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌未检测到blaOXA-51-like;blaOXA-23-like阳性125株(91.24%,125/137),其中包括2株亚胺培南敏感鲍曼不动杆菌;整合酶Int1阳性106株(77.37%,106/137);1株检测出blaOXA-24-like;114株(83.21%,114/137)blaOXA-23-like上游存在ISAbal;未检测到blaOXA-58-like和整合酶Int2基因。(6)部分blaOXA-23-like、blaOXA-24-like、blaOXA-51-like阳性菌株全基因测序与NCBI在线数据库Blast后基因型分别为OXA-23、OXA-72、OXA-66。 结论:我院收集菌株ITS基因型主要为鲍曼不动杆菌。我院菌株耐药情况十分严重,全部为多重耐药菌株。亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌仅对头孢哌酮-舒巴坦SCF保持相对较高的敏感率。OXA-23型酶是我院鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药的主要原因,ISAba1对其过表达起一定作用。