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HIV-1逆转录酶是HIV-1复制过程中重要的功能酶之一,催化以HIV-1基因组单链正链RNA为模板合成双链DNA的过程,HIV-1感染细胞发生复制过程必须依赖逆转录酶,因此,逆转录酶是研发抗艾滋病药物的重要靶点。HIV-1逆转录酶是由p66和p51双亚基组成的异源二聚体,其功能亚基p66具有三种酶活性：RNA依赖的DNA聚合酶活性、DNA依赖的DNA聚合酶活性及RNase H活性,目前临床上所有逆转录酶抑制剂均为DNA聚合酶活性抑制剂,病人长期用药后极易发生耐药,因此,寻找新型HIV-1逆转录酶抑制剂对研发抗艾滋病药物具有重要意义。本论文应用以HIV-1复制为靶点的VSVG/HIV-luc药理模型,从98个定向合成小分子噻唑类化合物中筛选得到22个活性化合物,IC50在0.01～20μmol·L-1之间。采用RNA依赖的DNA聚合酶活性测定实验和RNase H活性测定实验研究了其中四个化合物(GCB123、GCB130、GCB133和GCB162)的作用机制,结果显示噻唑类化合物是逆转录酶双重抑制剂,对RNA依赖的DNA聚合酶活性和RNase H活性均有抑制作用；进一步应用2种常见耐药型HIV-1重组病毒模型评价了22个噻唑类化合物的作用特点,结果显示部分噻唑类化合物对HIVRT-K103N和HIVRT-Y181C耐药突变株的复制有较好的抑制作用。本论文又应用VSVG/HIV-luc模型从1000多个天然小分子提取物中筛选得到活性化合物RM-1和KHY-033,IC50分别为0.420μmol·L-1和1.87μmol·L-1。应用实时荧光定量PCR测定HIV-1逆转录过程模型考察了化合物RM-1和KHY-033对HIV-1逆转录过程的影响,结果显示化合物RM-1和KHY-033均剂量依赖的抑制HIV-1逆转录过程中四个环节产物的生成；采用RNA依赖的DNA聚合酶活性测定实验和RNase H活性测定实验研究了RM-1和KHY-033对逆转录酶活性的影响,结果显示化合物RM-1通过抑制逆转录酶的RNA依赖的DNA聚合酶活性和RNase H活性抑制HIV-1复制；KHY-033通过抑制RNase H活性抑制HIV-1复制,对RNA依赖的DNA聚合酶活性无影响,提示这两个化合物都是新结构类型、新作用机制的逆转录酶抑制剂。应用VSVG/MLV-GFP模型评价了化合物RM-1与KHY-033的特异性,以及应用9种常见非核苷类逆转录酶抑制剂耐药型HIV-1重组假病毒模型检测耐药突变株对其耐药性,结果表明：化合物RM-1可剂量依赖性、特异性的抑制HIV-1复制,且对HIVRT-K103N、HIVRT-L1001,K103N、HIVRT-K103N,P225H、HIVRT-K103N,G190A和HIVRT-K103N,V108I耐药突变株的复制均有较好的抑制作用,而HIVRT-Y181C、HIVRT-Y188L、HIVRT-K103N,Y181C和HIVRT-K103N,Y188L对RM-1均产生耐药,耐药倍数分别为16.1、>71.4、12和37.8倍。化合物KHY-033对HIVRT-K103N和HIVRT-Y181C耐药突变株的复制均有较好的抑制作用,且可抑制小鼠白血病病毒的复制,可能为广谱抗逆转录病毒化合物。