微注射法、基因枪轰击法以及基于烟草花叶病毒和马铃薯X病毒的互补分析法是已经建立起来的用于鉴定假定移动蛋白和胞间连丝介导的大分子运输的研究方法。在本研究中,我们在黄瓜花叶病毒(CMV)侵染性克隆的基础上,建立了一种农杆菌介导的用于研究生物大分子胞间移动和长距离移动的移动互补体系。将CMVRNA3上编码的运动蛋白MP替换为定位至内质网的erGFP,构建成CMV移动缺陷型报告载体pCB301-CMV RNA3-MP::erGFP。CMV MP的体外表达可以使RNA3-MP::erGFP报告载体从原始细胞向相邻细胞有效移动,而CMVMP的突变体M5则不能够使其发生移动。该体系的显著特征是,当CMV RNA1和RNA2存在时,RNA3-MP::erGFP报告载体一旦从原始细胞中移出,移动信号就会被大量扩增。荧光细胞的最佳观察时间为浸润后48-60小时,而烟草浸润后的最适温度为25-28℃。其他属植物病毒的运动蛋白,如番茄斑萎病毒(TS VV)的运动蛋白NSm和水稻条纹病毒(RSV)的运动蛋白NSvc4,也可以使RNA3::erGFP报告载体从原始表达细胞移动到相邻细胞中。同样,该体系也可以鉴定异源病毒属运动蛋白的长距离移动,通过将CMV RNA3上的MP替换成TSWV NSm 或 RSV NSvc4,构建嵌合突变体病毒,利用农杆菌介导将其与CMV的基因组共浸润本氏烟,发现它们也可以系统移动。这种利用农杆菌介导的CMV移动互补体系简单、高效且可靠。这种方法为鉴定未知植物病毒可能的运动蛋白以及研究植物内源生物大分子胞内运输机制方面提供了有效的体系。