HOXA10在子宫内膜癌中的作用研究

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目的:  近年来,子宫内膜癌的发病率越来越高,严重影响女性健康。同源框基因A10(HomeboxA10,HOXA10)是同源框基因家族中重要的一员,在正常人的子宫内膜腺上皮、间质细胞中均有表达,起到编码转录因子、促进细胞分化和调控胚胎发育的作用。目前研究显示HOXA10的表达与子宫内膜癌的发生发展密切相关。研究表明在子宫内膜癌患者内膜中均检测到HOXA10的异常表达,本研究旨在深入探究子宫内膜癌中HOXA10的表达情况、HOXA10对子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞株行为学的影响以及雌激素对子宫内膜癌细胞株Ishikawa细胞株中HOXA10的调控作用,对以HOXA10为靶标诊断、治疗疾病提供新思路。  方法:  1、收集2012年至2013年收治于鼓楼医院妇产科的子宫内膜癌患者内膜20例(G1期10例,G2期6例、G3期2例,浆液性乳头状癌2例)及子宫肌瘤患者行子宫切除术患者的正常增殖期内膜25例,Realtime-PCR及Western blot技术检测HOXA10及ERα在子宫内膜癌及正常内膜组织中的表达情况。  2、体外培养子宫内膜癌Ishikawa细胞株,不同滴度ad-flag-HOXA10腺病毒质粒感染Ishikawa细胞株后,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;ad-flag-HOXA10腺病毒质粒及其阴性对照ad-flag-lacz腺病毒质粒感染Ishikawa细胞株,LipfectamineTM2000为载体将si-HOXA10及其阴性对照si-NC质粒分别转染Ishikawa细胞株,人工重组基底膜侵袭小室(Transwell)检测各组细胞侵袭能力。  3、不同浓度雌激素17β-estradiol(E2)及雌激素受体拮抗剂ICI182780作用于Ishikawa细胞株后不同时间点,利用Realtime-PCR及Western blot技术检测ERα、HOXA10 mRNA及蛋白水平表达的变化。  结果:  1、肿瘤组织中HOXA10、ERα在mRNA及蛋白水平表达均低于正常内膜组织。  2、上调Ishikawa细胞株中HOXA10的表达后,细胞株的凋亡较对照组上调1.85倍(5moi)、4.4倍(10moi)、5.08倍(20moi),且大多数细胞处于早期凋亡;上调Ishikawa细胞株中HOXA10的表达后Ishikawa细胞株的侵袭能力较对照组下调21.3%,干扰Ishikawa细胞株中HOXA10的表达后Ishikawa细胞株的侵袭能力较对照组上调1.4倍。  3、HOXA10在ER阳性的Ishikawa细胞株中表达高于ER阴性的HEC-1-B细胞株;雌激素能上调Ishikawa细胞株中HOXA10蛋白表达水平;雌激素受体拮抗剂ICI能拮抗Ishikawa细胞株中ERα的表达,下调Ishikawa细胞株中HOXAI0蛋白的表达;ICI能减弱E2对HOXA10的上调作用。  结论:  HOXA10在子宫内膜癌内膜中表达低于正常内膜;高表达HOXA10能够促进子宫内膜癌Ishikawa细胞株的凋亡,并抑制其侵袭能力,抑制HOXA10的表达能促进Ishikawa细胞株的侵袭能力;一定浓度E2通过E2/ER途径上调Ishikawa细胞株中HOXA10的表达。
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