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目的：通过研究尿液中与粘多糖病Ⅱ型(mucopolysaccharidosis typeⅡ，MPSⅡ)相关的差异蛋白质组：1.筛选MPSⅡ型的分子标志物，帮助疾病诊断;2.寻找MPSⅡ型所影响的信号通路，为致病机制的阐明提供研究依据。 方法：选取2015年3月～2016年6月在解放军总医院儿童医学中心确诊的MPSⅡ型患者12例纳入疾病组，同时选取本院健康查体人员15例纳入健康对照组，留取晨尿。1.将MPSⅡ型组和健康对照组分别随机选取6例标本混合，通过双向凝胶电泳(two dimensional gel electrophoresis，2-DE)分离尿液中总蛋白，然后运用基质辅助激光解析电离质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS)技术鉴定差异蛋白种类。2.从中选择α1-抗胰蛋白酶(α1antilrypsin，α1-AT)、神经节苷脂酶激活因子(Gm2activator protein，GM2A)、维生素D结合蛋白(vitamin D-binding protein，DBP)和前列腺素D合成酶(lipocalin-type prostaglandin D synthase，L-PGDS)四种蛋白，运用ELISA和Western Blot方法检测其在MPSⅡ型组和健康对照组个体尿液中的含量，分析差异性。3.采用同位素标记相对和绝对定量(isobaric tags for relative and absolute quantification，iTRAQ)技术标记MPSⅡ型组和正常对照组混合尿液中蛋白，运用液相色谱串联质谱(liquid chromatography-mass spectrometer/mass spectrometer，LC-MS/MS)法检测蛋白种类和含量，然后利用Gene Ontology(GO)和Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes(KEGG)数据库进行生物信息学分析。 结果：1.通过2-DE方法检测出32个差异蛋白点，运用MALDI-TOF-MS技术共鉴定出20种差异蛋白，其中AAT、DBP、溶酶体葡糖苷酶前体等10种蛋白表达上调，GM2A、L-PGDS、免疫球蛋白κ轻链1等10种蛋白表达下调。2.用ELISA方法测得MPSⅡ组α1-AT/Cr比值为(55.89±7.43)mg/mmol，对照组α1-AT/Cr比值为(33.32±3.59)mg/mmol，MPSⅡ组显著高于对照组(P＜0.05);MPSⅡ组GM2A/Cr比值为(1.31±0.14)ng/mmol，对照组GM2A/Cr比值为(2.68±0.44)ng/mmol，MPSⅡ组显著低于对照组(P＜0.05)MPSⅡ组DBP/Cr比值为(0.35±0.06)ng/mmol，对照组DBP/Cr比值为(0.14±0.02)ng/mmol，MPSⅡ组显著高于对照组;MPSⅡ组L-PGDS/Cr比值为(8.02±2.04)pg/mmol，对照组L-PGDS/Cr比值为(18.14±1.67)pg/mmol，MPSⅡ组显著低于对照组(P＜0.05)。运用Western Blot方法检测疾病组与对照组中α1-AT和GM2A含量，通过条带灰度差异可判断，疾病组尿液中α1-AT含量明显升高，GM2A含量明显减低。3.采用iTRAQ技术，联合LC-MS/MS，对MPSⅡ型患者和正常对照组尿液进行蛋白质组学分析，共鉴定出693种差异蛋白，其中疾病组中表达上调的244种，下调的449种。差异蛋白富集的通路与应激反应、氧化磷酸化反应、补体系统、核糖体和剪接体相关。 结论：1.MPSⅡ型患者尿液中α1-AT和DBP含量显著上升，而GM2A和L-PGDS含量显著下降，可以考虑作为疾病辅助诊断指标。2.MPSⅡ型的病理改变可能与应激反应、氧化磷酸化、补体系统、核糖体和溶酶体等相关通路的异常有关，为致病机制的阐明提供了方向。