乳腺癌是人类常见的一种恶性肿瘤,也是女性主要恶性肿瘤之一。目前化疗仍是乳腺癌治疗的主要途径。顺铂(cisplatin, DDP)是治疗乳腺癌最有效的化疗药物之一,它是临床上广泛应用的一种抗癌药物,对多种恶性肿瘤的治疗有作用。本研究以乳腺癌细胞株MCF-7作为研究对象,研究DDP诱导MCF-7细胞DNA损伤修复通路中相关蛋白的表达变化,探讨DDP对DNA损伤修复通路作用的分子机制。通过MTT检测DDP对乳腺癌细胞生长的影响,确定其IC50值。IC50值对应的药物浓度作用乳腺癌细胞MCF-7不同的时间后,免疫荧光组织化学结果显示,DDP作用MCF-7细胞6h后即有DNA双链断裂标记分子γ-H2AX出现,同时采用Western blotting方法,在蛋白水平也检测到γ-H2AX随着DDP作用时间的增加有上调的趋势。RT-PCR验证除了atm、chk2基因外,其他DNA损伤修复相关基因,如p53、p21、p27在DDP作用于MCF-7细胞株后都有表达上调的趋势。采用Western blotting技术检测DDP干预后DNA损伤修复相关蛋白的表达情况,结果发现磷酸化的ATM、Chk2和对照组相比蛋白表达水平显著上调。而P53、P27、P21蛋白表现出先上调后下调的趋势,与基因水平的表达不一致,推测有可能是随着药物作用时间的增加,细胞发生凋亡,在此过程中使得细胞内一些重要蛋白发生降解。因此,我们进一步对DDP作用后乳腺癌细胞MCF-7进行细胞凋亡的研究,通过hochest33258染色及Caspase-3蛋白表达变化发现,细胞在36h发生了明显的凋亡现象。由此我们推测DDP作用于乳腺癌细胞株MCF-7可以引起细胞的DNA双链断裂,并且最终通过DNA损伤介导的细胞凋亡来杀死细胞。