【摘 要】
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本文探讨了添加L-肉碱对鲤鱼生产性能、排氨率、抗冷应激能力的影响及其作用机制。本试验选取130 g左右的健康鲤鱼随机分为3组,每组90尾,分别饲喂对照组饲料（基础配方饲料）、高脂组饲料（在对照组饲料配方基础上蛋白质减低6%,脂肪增加5%）、高脂L-肉碱组饲料（在高脂组饲料配方基础上添加500 mg/Kg L-肉碱）。饲喂8周后,检测生长性能、肌肉成分、血浆生化与抗氧化能力等指标。通过纳氏比色法连续
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本文探讨了添加L-肉碱对鲤鱼生产性能、排氨率、抗冷应激能力的影响及其作用机制。本试验选取130 g左右的健康鲤鱼随机分为3组,每组90尾,分别饲喂对照组饲料（基础配方饲料）、高脂组饲料（在对照组饲料配方基础上蛋白质减低6%,脂肪增加5%）、高脂L-肉碱组饲料（在高脂组饲料配方基础上添加500 mg/Kg L-肉碱）。饲喂8周后,检测生长性能、肌肉成分、血浆生化与抗氧化能力等指标。通过纳氏比色法连续测量鲤鱼饱食后8 h内每小时的水体氨氮浓度,从而得到各组鲤鱼的排氨率变化规律。通过动物行为仪观测急性冷应激下鲤鱼的游泳能力、持续冷应激6h、12 h后血糖浓度、血浆皮质醇浓度等指标,监测L-肉碱对鲤鱼抗急性冷应激能力的影响。并基于RNA-seq测序技术和生物信息学分析来探究其作用机理。试验结果表明:（1）本试验表明高脂L-肉碱组相较于高脂组,末均重显著增加（P<0.05）;肠长指数相较其他两组显著增加（P<0.05）。同时高脂L-肉碱组血浆总胆固醇值显著低于高脂组（P<0.05）;且高脂L-肉碱组与高脂组血浆尿素氮含量,与对照组相比,均显著降低（P<0.05）,且两组之间差异不显著（P>0.05）;高脂L-肉碱组血浆过氧化氢酶的值远高于高脂组（P<0.05）;高脂L-肉碱组血浆总抗氧化能力显著提高（P<0.05）。另外,通过检测各组鲤鱼肌肉成分可知,高脂组与高脂L-肉碱组背肌中灰分含量、锌的含量皆远低于对照组（P<0.05）;高脂L-肉碱组显著提高背肌蛋白质和铁含量（P<0.05）;高脂L-肉碱组显著降低背肌中的水分（P<0.05）。（2）测量鲤鱼饱食后8 h内水体氨氮浓度发现,三组排氨率均呈现先升高后下降的趋势,且对照组与高脂组排氨率的波峰出现在第2 h,高脂L-肉碱组出现在第1 h。综合来看,对照组的排氨率最高,其次是高脂组,高脂L-肉碱组最低。（3）在急性冷应激0.5 h内,发现高脂L-肉碱组鲤鱼运动路程最长,高脂组其次,对照组最短;对照组鲤鱼有52.23%的时间静止,而高脂组和高脂L-肉碱组分别只有18.47%,14.08%的时间静止。鲤鱼冷刺激后进行血清皮质醇和血糖浓度检测可知,高脂L-肉碱组6 h和12 h的皮质醇低于对照组和高脂组,而血糖浓度高于另外两组,但均未达到显著水平（P>0.05）。（4）分析三组肝胰脏转录水平发现,相较于对照组,高脂组有1499个基因上调,1155个基因下调;而高脂L-肉碱组上调了2823个基因,下调了2325个基因。与高脂组相比,高脂L-肉碱组有2107个基因表达量上调,1936个基因下调。其中与高脂组相比,高脂L-肉碱组cpt1和cpt2等与脂肪β氧化作用有关的基因以及肝胰脏中蛋白质合成关键基因mtor的表达量上调,而fasn、elovl6等与脂质生成以及延伸有关的基因表达量下调。综上,在日粮中添加500 mg/Kg L-肉碱能够缓解饲喂高脂饲料对鲤鱼生长性能产生的负面影响。降低血浆胆固醇含量,增加背肌蛋白质的沉积,减少氨氮排放,增强鱼类抗氧化以及抗冷应激的能力。其中L-肉碱促生长、降脂、增加氮储备的具体的分子机制为:L-肉碱通过上调脂肪分解代谢过程的关键基因cpt1和cpt2的表达量,来提高鲤鱼脂肪分解能力;下调脂肪酸生物合成的关键基因fasn、以及脂质延伸的关键基因elovl6的表达量,来影响脂质生成以及延伸,从而降低鲤鱼体内脂质的蓄积;并上调了肝胰脏中mtor的表达,进而促进蛋白质的合成。
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