microRNA-10b基因转染对人胰腺癌细胞的影响

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背景胰腺癌(pancreatic cancer,PC)是一种诊断治疗困难、预后差、死亡率高的恶性肿瘤,而目前治疗效果欠佳,5年生存率仅为4%~5%,所以寻找新的肿瘤标记物和基因治疗对胰腺癌具有十分重要的意义。microRNA(miRNA)是一类长约21~26bp的单链非编码RNA,它通过转录后调控基因表达参与多种生命进程。鉴于miRNA在多种肿瘤组织中的表达异常,miRNA可能作为新的肿瘤标记物和治疗靶点。胰腺癌miRNA表达谱研究发现,microRNA-10b(miRNA-10b,miR-10b)在肿瘤组织中的表达水平较正常组织有一定程度的提高,这预示着miR-10b在胰腺癌发生发展中可能会起到一定作用。本文探讨的是miR-10b对ASPC-1的影响。目的研究miR-10b基因对人胰腺癌细胞ASPC-1生物学行为的影响。方法以脂质体转染法将miR-10b重组正、反义真核表达质粒载体转染ASPC-1细胞株,并通过荧光显微镜(定量或者定性)和运用实时荧光定量PCR和荧光检测瞬时转染效率,进而检测不同组间生长、凋亡、迁移和侵袭能力的差异及其对RhoC、VEGF和EGFR蛋白表达的调控。结果实时荧光定量PCR证明转染miR-10b重组载体可使miR-10b表达水平提高,过表达miR-10b对ASPC-1有生长促进、抑制凋亡、增强侵袭和迁移的作用,并增加基因RhoC、VEGF和EGFR蛋白的表达,而转染反义miR-10b载体出现相反的结果。结论miR-10b对人转移胰腺癌细胞ASPC-1的生长、凋亡、侵袭和转移,以及RhoC、VEGF和EGFR蛋白表达产生影响。
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