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目的肝癌(Liver cancer)是指发生在肝脏的恶性肿瘤,包括原发性肝癌与转移性肝癌,其发病率与死亡率较高,严重威胁着人类的生命健康。治疗肝癌的传统方法也是主要的治疗方法就是手术切除、放射治疗、化学抗肿瘤药物治疗。然而传统的治疗方法效果并不理想,肝癌的复发和转移难以控制。近年来,人们对天然植物的抗肿瘤作用的研究越来越多。本实验从大豆、绿豆、灵芝和生姜中分别提取分离出大豆黄酮、Mung、Gin和L08,用这四种药物处理体外培养的肝癌细胞SMMC-7721,来研究它们对肝癌细胞SMMC-7721的增殖及对肝癌干细胞CD44表达水平的影响,从而希望为肝癌的防治提供新的实验依据。方法1.培养人肝癌细胞SMMC-7721,获得对数生长期细胞。2.配制100μg/ml、200μg/ml、300μg/ml、400μg/ml和500μg/ml浓度的大豆黄酮、Mung、Gin和L08,分别处理对数生长期的人肝癌细胞SMMC-7721,处理24小时、48小时和72小时,然后用MTT法测定细胞的增殖率并绘制细胞生长曲线。3.配制100μg/ml、300μg/ml、和500μg/ml的大豆黄酮、Mung、Gin和L08分别处理人肝癌细胞SMMC-7721,处理时间为24h。将荧光素FITC标记的抗体与处理过的细胞混合通过流式细胞仪检测细胞表面抗原CD44。4.配制100μg/ml、300μg/ml、和500μg/ml的大豆黄酮、Mung、Gin和L08分别处理人肝癌细胞SMMC-7721,并用Western Blot方法测定肝癌干细胞中CD44蛋白的表达水平。结果1.MTT结果显示：大豆黄酮、Mung、Gin和L08在不同的药物浓度和给药时间内对人肝癌细胞SMMC-7721的增值均有抑制作用,且浓度和抑制作用密切相关。2.流式细胞术结果显示：大豆黄酮、Mung、Gin和L08处理人肝癌细胞SMMC-772124h后,CD44阳性细胞数目均少于未给药对照组。3. Western Blot结果显示：大豆黄酮、Mung和L08处理人肝癌细胞SMMC-7721后CD44蛋白表达水平均有降低,且剂量与表达水平相关。但Gin不能降低人肝癌干细胞SMMC-7721中CD44的表达。结论1.大豆黄酮、Mung、Gin和L08均能抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖,并且抑制作用与浓度密切相关。2.大豆黄酮、Mung、Gin和L08均能抑制人肝癌细胞SMMC-7721中CD44阳性细胞的生长。3.大豆黄酮、Mung和L08均能降低人肝癌细胞SMMC-7721中CD44蛋白的表达,但Gin则不能降低人肝癌细胞SMMC-7721中CD44蛋白的表达。