参术止痒方溻渍治疗大鼠慢性肛周湿疹的实验研究

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目的通过湿疹面积和严重程度指数(eczema area and severity index,EASI)评分评估大鼠慢性肛周湿疹模型皮肤损伤,观察参术止痒方对慢性肛周湿疹皮损的作用;检测大鼠皮损部皮肤组织中核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid related factor 2,Nrf-2)蛋白表达水平,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,探讨参术止痒方溻渍是否通过调控Nrf-2信号通路抑制自由基,改善慢性肛周湿疹;检测肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)含量,探讨参术止痒方溻渍能否调控炎症因子,抑制慢性肛周湿疹的炎症反应。方法将40只健康SD雄性大鼠随机分为空白对照组,模型组,溻渍组和西药对照组,每组10只。除空白对照组外,其余各组用2,4-二硝基氯苯(dinitrochlorobenzene,DNCB)溶液建立大鼠慢性肛周湿疹模型。造模成功后,空白对照组和模型组予生理盐水溻渍,溻渍组和西药对照组分别给予止痒方溻渍,复方醋酸地塞米松乳膏外涂,日二次干预。观察各组大鼠肛周皮肤变化并进行EASI法评分。采用酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)法和免疫组化(immunohistochemistry,IHC)法检测大鼠皮损部皮肤组织中TNF-α、IL-1β含量,采用蛋白质印迹法(Western Blot,WB)法检测Nrf-2蛋白含量,采用羟胺法检测SOD含量,采用硫代巴比妥酸法(thiobarbituric acid,TBA)法检测MDA含量,探讨参术止痒方治疗慢性肛周湿疹的作用机制。结果1、与空白对照组大鼠皮肤比较,模型组、溻渍组和西药对照组大鼠EASI评分、皮肤组织内Nrf-2蛋白表达、TNF-α、IL-1β、MDA含量升高,SOD含量降低(P<0.05)。2、与模型组比较,溻渍组、西药对照组大鼠造模区EASI评分、TNF-α、IL-1β、MDA含量降低,皮肤组织内Nrf-2蛋白表达、SOD含量升高(P<0.05)。3、与西药对照组比较,溻渍组大鼠造模区EASI评分、皮肤组织内Nrf-2蛋白表达、IL-1β、SOD、MDA含量差异无统计学意义(P>0.05),TNF-α含量降低(P<0.05)。结论1、参术止痒方溻渍能改善慢性肛周湿疹大鼠红肿、丘疹、鳞屑样和苔藓样化的皮损状况;2、Nrf-2蛋白表达升高,SOD含量升高MDA含量降低,提示参术止痒方溻渍对慢性肛周湿疹的治疗机制可能与调节Nrf-2信号通路,抑制自由基,提高机体抗氧化能力有关;3、慢性肛周湿疹大鼠皮肤组织中TNF-α、IL-1β含量降低的情况表明,参术止痒方溻渍可能通过降低炎症因子的方式,减轻炎症反应。
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